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福建技术师范学院董倩获国家专利权

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龙图腾网获悉福建技术师范学院申请的专利雪蔗脱除甘蔗花叶病毒及脱毒苗的生产方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116762699B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-06发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310850360.X,技术领域涉及:A01H4/00;该发明授权雪蔗脱除甘蔗花叶病毒及脱毒苗的生产方法是由董倩;黄国强;郭晋隆;张文森;曹智设计研发完成,并于2023-07-12向国家知识产权局提交的专利申请。

雪蔗脱除甘蔗花叶病毒及脱毒苗的生产方法在说明书摘要公布了:本发明提供一种雪蔗脱除甘蔗花叶病毒及脱毒苗的生产方法。主要包括以下依序进行的步骤:1合格单芽种茎的制备;2消毒;3定植;4预热处理;5双高变温脱毒处理;6茎尖培养;7脱毒苗的获得。该发明克服了由于雪蔗种茎和腋芽含水量高,现有的甘蔗脱毒方法对其均不适用的缺点,所获得的脱毒苗经甘蔗花叶病毒RT‑PCR分子检测,脱毒率达到100%。本发明提供一种雪蔗脱除甘蔗花叶病毒及脱毒苗的生产方法,通过制备合格单芽种茎并对其进行预热处理、双高变温并结合光暗周期的交替处理以及剥取较大8‑10mm茎尖进行培养相结合的脱毒技术方法是本发明的核心创新点,具有操作简便,污染少,成活率高,从而提高了雪蔗的脱毒效率。

本发明授权雪蔗脱除甘蔗花叶病毒及脱毒苗的生产方法在权利要求书中公布了:1.一种雪蔗脱除甘蔗花叶病毒及脱毒苗的生产方法,其特征在于:主要包括以下依序进行的步骤:(1)合格单芽种茎的制备:以伸长期至成熟初期的雪蔗蔗茎为材料,用利刃切成具有单个蔗芽的多个单芽种茎备用,且所述蔗芽距离所述单芽种茎的上下两端部的节间长度均为3-4cm;(2)消毒:将步骤(1)获得的单芽种茎浸泡于消毒液中消毒15-20分钟,之后取出晾干切口备用;(3)定植:先将步骤(2)处理后的各单芽种茎平放于厚度≥6cm的基质上,且使各蔗芽均同向侧放;之后在各单芽种茎上覆盖上基质至基质刚好覆盖住该单芽种茎;最后用50-52℃的温水洒施浇透基质;(4)预热处理:将步骤(3)定植后的单芽种茎置于温度38±2℃、相对湿度≥80%的条件下暗培养24小时;(5)双高变温脱毒处理:将经步骤(4)预热处理后的单芽种茎先于46-48℃暗处理3-6h后,再于36-40℃光照12000Lx条件下处理3-8h,之后如此持续往复交替处理12天;待各蔗芽萌出后,每3天用50-52℃的温水浇透基质一次,直至各单芽种茎均长成带3-5片完全展开真叶的蔗芽苗;(6)茎尖培养脱毒:去除步骤(5)获得的蔗芽苗的顶端叶片,之后用医用酒精对该蔗芽苗的表面消毒30秒,再置于0.1%升汞溶液中消毒20分钟,最后用无菌水漂洗3遍;在无菌条件下剥取8-10mm茎尖接种到不定芽诱导液体培养基上培养3周,诱导产生不定芽,期间每7天换新一次的不定芽诱导液体培养基;(7)脱毒苗的获得:将步骤(6)获得的不定芽接种到增殖液体培养基中培养3周,诱导不定芽增殖长成丛生芽;筛选甘蔗花叶病毒阴性的丛生芽进行继代增殖,每3周继代一次,继代次数控制在10次以内;最后将增殖的丛生芽接种在生根液体培养基上培养3周,即获得脱除甘蔗花叶病毒的雪蔗脱毒苗;步骤(6)中所述的不定芽诱导液体培养基为:pH值6.0的MS培养基,该培养基中添加质量浓度2.0mgL的6-苄氨基嘌呤、质量浓度0.5mgL的1-萘乙酸、质量浓度20gL的蔗糖以及质量浓度0.2gL的活性炭;步骤(7)中所述的增殖液体培养基为:pH值6.0的MS培养基,该培养基中添加质量浓度0.5mgL的6-苄氨基嘌呤、质量浓度0.2mgL的萘乙酸、以及质量浓度30gL的蔗糖;步骤(7)中所述的生根液体培养基为:pH值6.0的12MS培养基,该培养基中添加质量浓度3.0mgL的1-萘乙酸、质量浓度50gL的蔗糖以及质量浓度1.0gL的活性炭。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人福建技术师范学院,其通讯地址为:350300 福建省福州市福清龙江街道校园新村1号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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