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龙图腾网获悉郑州大学申请的专利多种外泌体蛋白的同步检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115290883B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-06发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210729128.6，技术领域涉及：G01N33/533；该发明授权多种外泌体蛋白的同步检测方法是由吴拥军;丁丽华;屈凌波;何磊良;玉崧成;于斐;王艺琳;菅宁歌;杨瑞英;王佳设计研发完成，并于2022-06-24向国家知识产权局提交的专利申请。

本多种外泌体蛋白的同步检测方法在说明书摘要公布了：本发明提供了一种多种外泌体蛋白的同步检测方法，包括步骤：形成免疫磁珠MBs2@Ab1、形成多种Ab2‑W、形成MBs3Track、形成双抗夹心复合物、形成多种核酸短链P、形成待测荧光液和荧光检测等七个步骤。该同步检测方法主要是先利用DNAzyme将外泌体蛋白转换为核酸，再利用CRISPRCas系统检测核酸，两者结合实现双重信号放大，然后通过荧光进行信号区分，最终实现多种外泌体蛋白浓度的同步定量检测，该同步检测方法灵敏度高、特异性强、成本低、操作简单，而且有利于临床上实现同步定量检测多种外泌体蛋白。

本发明授权多种外泌体蛋白的同步检测方法在权利要求书中公布了：1.一种非诊断目的的多种外泌体蛋白的同步检测方法，包括步骤：形成免疫磁珠：将多种待测外泌体蛋白的捕获抗体Ab1同时偶联到羧基磁珠MBs2上形成免疫磁珠MBs2@Ab1；形成多种Ab2-W：将所述多种待测外泌体蛋白中的每一种外泌体蛋白对应的检测抗体Ab2生物素化，形成生物素化检测抗体Ab2-Bio；将每一种生物素化检测抗体Ab2-Bio与对应的脱氧核酶W偶联形成偶联物Ab2-W；形成链霉亲和素磁珠Track：将链霉亲和素磁珠MBs3与所述多种待测外泌体蛋白中的每一种外泌体蛋白的生物素化底物链T进行偶联，形成修饰有多种所述生物素化底物链T的MBs3Track，将该MBs3Track重悬于剪切反应液中形成MBs3Track悬浮液，其中，所述剪切反应液中包括辅酶因子和RNase抑制剂；形成双抗夹心复合物：将所述免疫磁珠MBs2@Ab1、含有所述多种待测外泌体蛋白的待测样品以及多种偶联物Ab2-W混合孵育，形成双抗夹心复合物；形成多种核酸短链P：将所述MBs3Track悬浮液加入所述双抗夹心复合物中进行再次孵育，使每一脱氧核酶W切割对应的生物素化底物链T产生核酸短链P，磁分离，收集含有多种核酸短链P的上清液；形成待测荧光液：先将所述含有多种核酸短链P的上清液与信号溶液混合孵育，其中，所述信号溶液中包括每一核酸短链P对应的Cas蛋白、Cas-crRNA和荧光信号探针，使每一核酸短链P与其对应的Cas-crRNA杂交，激活对应的Cas蛋白以切割对应的荧光信号探针使其荧光基团恢复荧光，形成待测荧光液，其中，所述Cas蛋白为Cas12a或Cas13a，所述Cas-crRNA为Cas12a-crRNA或Cas13a-crRNA；荧光检测：采用多功能微孔板读板机同步检测所述待测荧光液中的每一荧光基团的荧光强度，利用每一荧光基团的荧光强度与对应的待测外泌体蛋白的浓度之间的关系构建对应的回归方程。

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