中国科学院南京土壤研究所刘云获国家专利权
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龙图腾网获悉中国科学院南京土壤研究所申请的专利高通量筛选启动子增强大肠杆菌异源表达碳酸酐酶的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118726430B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-10发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411061902.6，技术领域涉及：C12N15/70；该发明授权高通量筛选启动子增强大肠杆菌异源表达碳酸酐酶的方法是由刘云;姚丹丹;李赟卉;王辉设计研发完成，并于2024-08-05向国家知识产权局提交的专利申请。
本高通量筛选启动子增强大肠杆菌异源表达碳酸酐酶的方法在说明书摘要公布了：本发明属于微生物的基因工程技术领域，更具体地说，涉及高通量筛选启动子增强大肠杆菌异源表达CA的方法，该方法包括以下步骤：S1，构建表达载体，将启动子文库用于构建载体，百脉根中间根瘤菌的碳酸酐酶基因MlCA作为目的基因；S2，构建工程菌，将S1中的表达载体转化至大肠杆菌获得工程菌；S3，诱导表达重组MlCA，培养S2中的工程菌，使用IPTG作为诱导剂，诱导工程菌表达重组MlCA；S4，测定表达量，测定上述S3中不同启动子作用下表达的重组MlCA的表达量；S5，根据S4的测定结果，按照表达量从高到低进行排序，选择表达量排序前10％的启动子。本发明中通过高通量启动子筛选得到异源表达的重组MlCA，能够有效提高微藻固定CO2的性能。
本发明授权高通量筛选启动子增强大肠杆菌异源表达碳酸酐酶的方法在权利要求书中公布了：1.启动子在表达重组MlCA中的应用，其特征在于，所述应用包括以下步骤：P1，构建表达载体，将启动子用于构建载体，百脉根中间根瘤菌的CA基因MlCA作为目的基因；所述MlCA的核苷酸序列如SEQID:NO97所示；P2，构建工程菌，将P1中表达载体转化至大肠杆菌获得工程菌；P3，诱导表达重组MlCA，培养P2中的工程菌，使用IPTG作为诱导剂，诱导工程菌表达重组MlCA；所述启动子选自如下核酸中的一种：（1）如SEQID:NO85所示的核苷酸序列的核酸；（2）如SEQID:NO80所示的核苷酸序列的核酸；（3）如SEQID:NO62所示的核苷酸序列的核酸。
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