天津大学陈力群获国家专利权
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龙图腾网获悉天津大学申请的专利一种视网膜细胞的分类方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118028233B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-10发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202410024539.4,技术领域涉及:C12N5/0793;该发明授权一种视网膜细胞的分类方法是由陈力群;李鹏翔;邵文威;明东设计研发完成,并于2024-01-08向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种视网膜细胞的分类方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种视网膜细胞的分类方法,包括以下步骤,取动物视网膜,将预处理后的生物芯片与所述视网膜粘附,得到粘附后视网膜,对所述粘附后视网膜进行多种光刺激,采集电信号,将所述电信号进行滤波,去除背景噪声,提高信噪比,提取锋电位,进行统计分析,得到预处理后数据,对所述预处理后数据进行分类标记。本发明通过对离体视网膜施加光刺激,可视化视神经节细胞对不同刺激的响应情况,明显可以看出不同视神经节细胞对不同刺激具有不同的响应。
本发明授权一种视网膜细胞的分类方法在权利要求书中公布了:1.一种视网膜细胞的分类方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1,取动物视网膜,将预处理后的生物芯片与所述视网膜粘附,得到粘附后视网膜,其中,采用多聚赖氨酸预处理生物芯片,促进视网膜与生物芯片粘附;步骤2,对所述粘附后视网膜进行光刺激,分别施加局部刺激、全局刺激、闪烁刺激、颜色刺激、移动条刺激、形状刺激和黑白棋盘格刺激,每施加一种上述刺激后,需将视网膜暗光下保持10s,直至施加最后一种刺激,视网膜将光刺激的光信号转换成电信号,其中,所述局部刺激是以视网膜的中心为中心,其直径为700μm的光刺激,光照强度从0~SSSlux遵循正弦波形变化,频率从1Hz到5Hz逐渐增加,每个频率刺激时间为10s;所述全局刺激的直径为2mm,光照强度从0~SSSlux遵循正弦波形变化,频率从1Hz到5Hz逐渐增加,每个频率刺激时间为10s;所述闪烁刺激的直径为3mm,光照强度为0~SSSlux遵循方波变化,频率为1Hz;所述颜色刺激的直径为3mm,视网膜暗光下静息10s,蓝色刺激3s,暗光休息3s,绿色刺激3s,循环3次,所述移动条刺激的长度为800um,宽度为100um,刺激方向分为8个,分别是自上而下,自右上到左下,自右到左,自右下到坐上,自下而上,自左下到右上,自左到右,自左上到右下,每个方向的运动路径长度都为3mm;所述形状刺激的形状为三角形、正方形和圆形,首先是背景为黑色,每个形状的颜色均为绿色,每个形状刺激持续3s,黑暗休息3s,然后是背景为黑色,每个形状的颜色均为蓝色,每个形状刺激持续3s,黑暗休息3s,视网膜暗光休息10s;背景为白色,每个形状的颜色均为绿色,每个形状刺激持续3s,黑暗休息3s,背景为白色,每个形状为蓝色的刺激,每个形状刺激持续3s,形状间暗光休息3s,视网膜暗光休息10s,背景为蓝色,每个形状的颜色均为绿色,每个形状刺激持续3s,黑暗休息3s,视网膜暗光休息10s;背景为绿色,每个形状的颜色为蓝色,每个形状刺激持续3s,黑暗休息3s;所述黑白棋盘格刺激由50×50个方块组成,每个格子大小为50×50um,每个棋盘格的明暗随时间变化,由高斯函数随即生成,持续时间为5min;步骤3,采集电信号,将所述电信号进行滤波,去除背景噪声,提高信噪比,提取锋电位,进行统计分析,得到预处理后数据;步骤4,对所述预处理后数据进行分类标记,包括以下步骤:步骤4.1,将视网膜暗光下保持10s的休息时间去除,将数据降维至1kHz,对于局部刺激、全局刺激、闪烁刺激、颜色刺激、移动条刺激和形状刺激的响应信号分别进稀疏主成分分析,对上述刺激的响应信号依次提取20、20、4、6、16和18个特征向量;步骤4.2,针对移动条刺激的响应矩阵进行奇异值分解,分为时间相关分量和方向相关分量,对方向相关分量使用sPCA进行特征提取,提取出6个特征向量,同时将方向相关分量进行指数投影,提取计算方向指数作为方向选择性,根据选择性进行作图,不同细胞具有不同的方向选择性,以此分类视网膜神经细胞;步骤4.3,针对黑白棋盘格刺激的响应信号,使用发放——出发平均方法,计算视网膜神经节细胞的感受野,对感受野使用sPCA提取出10个特征向量,同时对感受野大小作图,不同视网膜神经细胞的感受野不相同,以此分类视网膜神经细胞;步骤4.4,将步骤4.1、4.2和4.3提取的特征向量进行组成,使用这100个特征向量进行聚类,采用GMM聚类,同时使用最大期望算法进行计算,将每个分量的协方差矩阵约束为对角线,使用贝叶斯信息准则BIC评价指标,当类别个数为40时,BIC最低,表明此时聚类效果最好。
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