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龙图腾网获悉山东普泽汇生物工程有限公司申请的专利一种高密度培养内生菌的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118497074B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-17发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202410797005.5，技术领域涉及：C12N1/20；该发明授权一种高密度培养内生菌的方法是由苑昊;薛超越设计研发完成，并于2024-06-20向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种高密度培养内生菌的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种高密度培养内生菌的方法，涉及内生菌培养技术领域，该方法，包括以下步骤：采用包含磷脂酰胆碱的浸提液在超声的条件下对黄芪粉末进行浸泡，获得包含黄芪活性成分的浸取液；将黄芪内生菌接种于包含浸取液的固体培养基上进行筛分培养活化；将活化后的黄芪内生菌接种到液体培养基中培养得到内生菌种子液；将内生菌种子液置于培养液中发酵培养，得到高密度的黄芪内生菌；其中，培养液包括：浸取液10‑15份、蛋白胨4‑6份，酵母粉1.5‑3份，葡萄糖4‑6份，微量盐溶液1.5‑2.5份，柠檬酸铜0.2‑0.3份，柠檬酸二胺0.1‑0.20份，C6挥发物1.5‑2.5份、羟基十八碳二烯酸1‑2份、LB培养基1000份；本发明能够实现提高菌体产量，减少人力物力使用。

本发明授权一种高密度培养内生菌的方法在权利要求书中公布了：1.一种高密度培养内生菌的方法，其特征在于，包括以下步骤： 采用包含磷脂酰胆碱的浸提液在超声的条件下对黄芪粉末进行浸泡，获得包含黄芪活性成分的浸取液，包括：将黄芪粉末与所述浸提液在45℃-60℃的条件下超声提取0.5h-2h，后滤去滤渣获得浸取液； 将黄芪内生菌接种于包含所述浸取液的固体培养基上进行筛分培养活化，所述黄芪内生菌为鞘氨醇杆菌、球毛壳菌或草假单胞菌； 将活化后的所述黄芪内生菌接种到液体培养基中培养得到内生菌种子液； 将所述内生菌种子液置于培养液中发酵培养，得到高密度的黄芪内生菌； 其中，所述包含所述浸取液的固体培养基的组成成分包括：蛋白胨4-6份，酵母粉1.5-3份，葡萄糖4-6份，维生素B族0.4-0.5份，浸取液10-15份，微量盐溶液1.5-2.5份，琼脂15份，鼠糖李酸1.5-2.0份，儿茶酚0.7-1.0份，无菌水1000份；所述维生素B族的组成成分按质量份数计包括：1-2份维生素B1、1-2份维生素B2、1-2份维生素B3、1-2份维生素B5、1-2份维生素B7、1-2份维生素B9、0.5-1份维生素PP； 所述培养液包括：浸取液10-15份、蛋白胨4-6份，酵母粉1.5-3份，葡萄糖4-6份，微量盐溶液1.5-2.5份，柠檬酸铜0.2-0.3份，柠檬酸二胺0.1-0.20份，C6挥发物1.5-2.5份、羟基十八碳二烯酸1-2份、LB培养基1000份；所述C6挥发物包括正己醛、Z-3-己烯醛和正己醇中的一种或多种； 所述培养液的初始pH值为7.0-8.0，持续增量控制ph始终不低于7，溶解氧含量为50-60％，培养温度为28℃，转速为100rpm； 所述培养液采用持续减量的方式加入发酵装置中，以控制所述发酵装置内前期铜元素为0.04-0.06gL，后期铜元素小于0.01gL； 所述的前期是指加入所述内生菌种子液培养12h内；所述后期是指加入所述内生菌种子液培养4d后；所述的持续增量为在1d后柠檬酸二胺的量逐渐增大； 所述浸提液按照质量份数包括以下组分： 磷脂酰胆碱1-3份、正己醇3-5份、氯化钠1-5份、聚山梨酯类2-4份、E-2-己烯醛0.1-0.2份和水100份； 所述的微量盐溶液的组成成分按照质量份数包括：0.5-1份FeSO4·7H2O，0.25-0.5份MnCl2·4H2O，0.5-1份MgSO4·7H2O，0.5-1份NaCl，0.5-1份CuSO4·5H2O，无菌水100份。

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