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龙图腾网恭喜复旦大学附属肿瘤医院申请的专利一种负载膜结合型肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体和小分子抗肿瘤药物的复合外泌体获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN113633758B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-17发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202110863628.4，技术领域涉及：A61K38/19；该发明授权一种负载膜结合型肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体和小分子抗肿瘤药物的复合外泌体是由刘继勇;姜良弟;顾永卫;武鑫;杜月;李爱雪;赵语南;唐晓萌设计研发完成，并于2021-07-29向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种负载膜结合型肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体和小分子抗肿瘤药物的复合外泌体在说明书摘要公布了：本发明涉及生物医药与肿瘤学技术领域，具体是一种负载膜结合型肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体和小分子抗肿瘤药物的复合外泌体及其制备方法和应用。所述的复合外泌体的膜表面携带TRAIL蛋白，膜内包载小分子抗肿瘤药物。本发明的复合外泌体制备工艺成熟、高效、重现性好、成本低；复合外泌体的体外和体内抗肿瘤效果显著，药物用量低且无毒副作用，生物安全性良好，为肿瘤临床治疗提供了新的策略。

本发明授权一种负载膜结合型肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体和小分子抗肿瘤药物的复合外泌体在权利要求书中公布了：1.一种负载膜结合型肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体和小分子抗肿瘤药物的复合外泌体，其特征在于，所述的复合外泌体的膜表面携带TRAIL蛋白，膜内包载小分子抗肿瘤药物雷公藤甲素TPL；所述的复合外泌体中TRAIL蛋白的浓度为205.1±13.6pgmL；所述的复合外泌体平均粒径为100～200nm；所述的小分子抗肿瘤药物的浓度为0.01～60μgmL； 所述的负载膜结合型肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体和小分子抗肿瘤药物的复合外泌体的制备方法，包括以下步骤： S1.构建慢病毒包装三质粒系统，使所述的慢病毒包装三质粒系统感染293T细胞，得到带有目的基因的慢病毒颗粒； S2.用含目的基因的慢病毒颗粒感染Raw264.7细胞，获得稳定过表达TRAIL的巨噬细胞系，标记为TRAIL-Raw264.7，从而使Raw264.7细胞分泌表达携带TRAIL的外泌体；所述慢病毒包装三质粒系统的组成包括pSPAX2、pMD2G和携带目的基因的穿梭质粒；其中，慢病毒三质粒系统感染293T细胞，能包装产生更多带有TRAIL基因的慢病毒；利用包装完成的慢病毒颗粒感染巨噬细胞Raw264.7，使巨噬细胞在膜上过表TRAIL蛋白，从而使其分泌表达携带TRAIL的外泌体； S3.采用梯度超速离心法，从TRAIL-Raw264.7细胞培养上清中提取细胞分泌的外泌体，得到高纯度表达携带TRAIL的外泌体，标记为TRAIL-Exo； S4.将小分子抗肿瘤药物TPL载入TRAIL-Exo，得到载有TRAIL和小分子抗肿瘤药物TPL的复合外泌体TRAIL-ExoTPL； 所述的将小分子抗肿瘤药物TPL载入TRAIL-Exo的方法为超声法；超声处理后，将混合物在37℃条件下放置0.5～1h，再置于4℃下1～2h；以120000×g离心60～90min沉淀外泌体，用PBS重悬，即得TRAIL-ExoTPL，保存于-80℃。

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