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龙图腾网恭喜中国科学院苏州生物医学工程技术研究所申请的专利金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌核酸快速检测方法及试剂盒获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114480690B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-24发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210178150.6，技术领域涉及：C12Q1/689；该发明授权金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌核酸快速检测方法及试剂盒是由孙义祥;陈弘毅;宋一之;林恺铖;胡慧杰;王敬开;郄兴旺;孙博书设计研发完成，并于2022-02-24向国家知识产权局提交的专利申请。

本金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌核酸快速检测方法及试剂盒在说明书摘要公布了：本发明公开了一种金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌核酸快速检测方法及试剂盒，该方法包括以下步骤：1待测样品核酸提取；2核酸恒温扩增：对金黄色葡萄球菌特有的nuc1基因或耐甲氧西林金黄色葡萄球菌特有的mecA基因的核酸进行环介导核酸恒温扩增；3扩增产物检测：利用CRISPR‑Cas12a体系检测扩增后的nuc1基因或mecA基因。本发明首次采用CRISPR‑Cas12a荧光探针法检测金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌核酸，具有灵敏度高、特异性强、耗时短、高通量、不依赖大型实验设备等优势；能方便用于基层实验和临床一线对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌核酸的基层快速检测。

本发明授权金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌核酸快速检测方法及试剂盒在权利要求书中公布了：1.一种金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌核酸快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤： 1）待测样品核酸提取； 2）核酸扩增： 利用核酸扩增体系对金黄色葡萄球菌特有的nuc1基因或耐甲氧西林金黄色葡萄球菌特有的mecA基因的核酸扩增； 3）扩增产物检测： 利用CRISPR-Cas12a体系检测扩增后的nuc1基因或mecA基因，CRISPR-Cas12a体系中，nuc1基因用nuc1-crRNA进行检测，mecA基因用mecA-crRNA进行检测； nuc1-crRNA的序列为： 5’-UAAUUUCUACUAAGUGUAGAUAAUGGUAAAGAUAAAGUACA-3’； mecA-crRNA的序列为： 5’-UAAUUUCUACUAAGUGUAGAUCCAAUAACUGCAUCAUCUUU-3’； 所述步骤2）中，核酸扩增采用环介导核酸恒温扩增方法，核酸扩增体系包括用于nuc1基因的扩增引物组和用于mecA基因的扩增引物组； 用于nuc1基因的扩增引物组包括： nuc1-F3：5’-TCGCTTGCTATGATTGTGG-3’； nuc1-B3：5’-ACATACGCCAATGTTCTACC-3’； nuc1-FIP： 5’-GTACAGTTTCATGATTCGTCCCGCCATCATTATTGTAGGTGT-3’； nuc1-BIP： 5’-TGTTCAAAGAGTTGTGGATGGTGTACAGGCGTATTCGGTT-3’； nuc1-FLP：5’-TTGAAAGGACCCGTATGATTCA-3’； nuc1-BLP：5’-GATACGCCAGAAACGGTGA-3’； 用于mecA基因的扩增引物组包括： mecA-F3：5’-GGTACAAGATGATACCTTCGTT-3’； mecA-B3：5’-ATAGCAGTACCTGAGCCAT-3’； mecA-FIP： 5’-TCTTCAGAGTTAATGGGACCAAACAGAAAGTCGTAACTATCCTC-3’； mecA-BIP： 5’-AAGCTCCAACATGAAGATGGCTTGTATGTGCGATTGTATTGC-3’； mecA-FLP：5’-ACCTAATAGATGTGAAGTCGCT-3’； mecA-BLP：5’-CGTGTCACAATCGTTGACG-3’； CRISPR-Cas12a体系还包括LaCas12a和ssDNA荧光探针，ssDNA荧光探针的序列为：5’-6FAM-TTTATTT-3’-BHQ1； 所述步骤1）中酶解法进行核酸提取，具体方法为：取待测样品，离心后去上清，加入TE溶液，混匀，离心去上清，加入溶菌酶和TritonX-100，混匀，37℃，反应，得到待测样品的核酸提取液； 恒温扩增体系中还包括Primermix、IsothermoBuffer、Mg2+、dNTP、H2O和聚合酶； 所述步骤1）中采用酶解法进行核酸提取； 所述步骤2）包括：取步骤1）得到的核酸提取液加入到恒温扩增体系中，于55-70℃下恒温反应，扩增nuc1基因或mecA基因； 所述步骤3）包括：取经步骤2）扩增后的产物加入到CRISPR-Cas12a体系中，混合均匀后于26-42℃反应，检测反应的荧光，其中激发波长为475-495nm，发射波长为510-530nm； 其中，CRISPR-Cas12a体系包括LaCas12a、ssDNA荧光探针、nuc1-crRNA或mecA-crRNA、TOLOBuffer和H2O。

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