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龙图腾网恭喜西门子医疗有限公司申请的专利制备用于CRISPR的个性化的靶标不相关的向导RNA池的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114616342B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-24发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202080076212.1，技术领域涉及：C12Q1/6806；该发明授权制备用于CRISPR的个性化的靶标不相关的向导RNA池的方法是由黄意巍设计研发完成，并于2020-10-19向国家知识产权局提交的专利申请。

本制备用于CRISPR的个性化的靶标不相关的向导RNA池的方法在说明书摘要公布了：本发明涉及使用用于sgRNA引导的核酸结合蛋白的合成单链向导RNAsgRNA获得靶标多核苷酸的富集的个性化群体的方法，并且涉及获得用于sgRNA引导的核酸结合蛋白的个性化的靶标不相关的合成单链向导RNAsgRNA的池的方法。还提供了包含通过本发明的方法可获得的sgRNA的池的试剂盒，通过本发明的方法可获得的sgRNA的池的应用以及监测疾病状况的方法。

本发明授权制备用于CRISPR的个性化的靶标不相关的向导RNA池的方法在权利要求书中公布了：1.获得靶标多核苷酸的富集的群体的方法，所述方法包括： （i）从获自受试者的样品纯化mRNA分子的群体； （ii）从步骤（i）的所述mRNA分子制备cDNA； （iii）从步骤（ii）中获得的所述cDNA扩增一条或多条靶标序列以获得DNA分子的池； （iv）使所述扩增的DNA分子片段化以获得片段； （v）将步骤（iv）的所述片段连接至能够结合至同源相互作用子的标签以获得标签化的捕手寡核苷酸的池； （vi）提供用于制备用于sgRNA引导的核酸结合蛋白的合成单链向导RNA（sgRNA）的池的起始寡核苷酸的池，其中所述起始寡核苷酸包括启动子节段、作为捕手寡核苷酸的潜在互补序列的随机节段和结合节段，其与用于与所述用于sgRNA引导的核酸结合蛋白相互作用的支架序列的至少一部分互补； （vii）使所述起始寡核苷酸的池与所述标签化的捕手寡核苷酸杂交； （viii）通过将所述标签结合至同源相互作用子，从所述起始寡核苷酸的池除去起始寡核苷酸和标签化的捕手寡核苷酸的复合物，借此获得减少的起始寡核苷酸的池； （ix）用步骤（viii）中所获得的所述减少的起始寡核苷酸的池制备sgRNA的池； （x）使用步骤（ix）中获得的所述sgRNA的池，通过用于sgRNA引导的核酸结合蛋白切割获自测试样品的多核苷酸的混合物；和 （xi）从步骤（x）中获得的所述多核苷酸的混合物尺寸选择一条或多条未切的靶标多核苷酸； 其中，步骤（ix）用步骤（viii）中所获得的所述减少的起始寡核苷酸的池制备sgRNA的池包括： 将单链寡核苷酸通过结合元件杂交至在步骤viii中所获得的起始寡核苷酸，所述结合元件存在于所述起始寡核苷酸中； 通过DNA延伸反应填充杂交复合物的单链部分； 将所得的双链模板分子进行扩增； 通过所述启动子节段将模板转录成RNA分子；并且 其中，所述sgRNA包含对靶标多核苷酸不特异的序列和sgRNA支架节段。

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