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龙图腾网获悉首都医科大学附属北京积水潭医院申请的专利一种检测血液样本中不同类型血小板白细胞聚集体百分比水平以及平均荧光强度的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119959531B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-27发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510136474.7，技术领域涉及：G01N33/533；该发明授权一种检测血液样本中不同类型血小板白细胞聚集体百分比水平以及平均荧光强度的方法是由吴俊;代腾龙;梁爽设计研发完成，并于2025-02-07向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种检测血液样本中不同类型血小板白细胞聚集体百分比水平以及平均荧光强度的方法在说明书摘要公布了：本发明涉及生物技术领域，且公开了一种检测血液样本中不同类型血小板白细胞聚集体百分比水平以及平均荧光强度的方法，以采集4小时以内的EDTA抗凝血样本为待测样本，在室温下预处理，流式检测其中不同血小板白细胞聚集体的百分比水平以及表达强度。利用本发明所提供方法能够准确检测血液样本中不同类型的血小板白细胞聚集体。该检测血液样本中不同类型血小板白细胞聚集体百分比水平以及平均荧光强度的方法，本发明具有操作便捷、样本易得、无创无损、检测速度快、成本低等优势，本发明对于血栓风险评估及预测具有重要意义，有较好的临床应用价值。

本发明授权一种检测血液样本中不同类型血小板白细胞聚集体百分比水平以及平均荧光强度的方法在权利要求书中公布了：1.一种检测血液样本中不同类型血小板白细胞聚集体百分比水平以及平均荧光强度的方法，其特征在于，包括以下步骤： 1A将采集4小时内的全血样本平稳运送至实验室，置于室温放置； 2B以A所得血液样本为待测样本，流式检测其中不同类型血小板白细胞聚集体； 3B1使用补偿微球和特异性抗体制备各荧光单阳管，同时设置空白对照管；调节流式仪的前向角、侧向角和对应荧光类型通道的电压以及各荧光通道之间的补偿； 4B2取出A所得血液样本200ul置于流式管中，向其加入针对不同血小板白细胞聚集体表面分子的荧光标记抗体，并加入红细胞裂解液充分裂解红细胞，4℃避光孵育后，离心去上清后加入PBS缓冲液，再次离心去上清后，上样进行流式细胞检测，通过Flowjo软件分析得到不同亚类血小板白细胞聚集体百分比水平以及平均荧光强度； 5在所述B1中，按照如下I设置空白对照管和单阳管，I设置如下： 空白对照管：加入A所得全血样本和阳性微球、阴性微球，室温避光孵育，低流速上样； 单阳管-1：加入阳性微球、阴性微球、APCCD14抗体，室温避光孵育，低流速上样； 单阳管-2：加入阳性微球、阴性微球、PECD61抗体，室温避光孵育，低流速上样； 单阳管-3：加入阳性微球、阴性微球、FITCCD3抗体，室温避光孵育，低流速上样； 单阳管-4：加入阳性微球、阴性微球、APC-Cy7CD11b抗体，室温避光孵育，低流速上样； 单阳管-5：加入阳性微球、阴性微球、PE-Cy7CD15抗体，室温避光孵育，低流速上样； 单阳管-6：加入阳性微球、阴性微球、Percp5.5CD16抗体，室温避光孵育，低流速上样； 6在B1中，根据所述I设置的空白对照管、单阳管-1至-6，调节其中的APC、PE、FITC、APC-Cy7、PE-Cy7、Percp5.5通道的电压及各荧光通道之间的补偿； 7根据所述I设置的空白对照管、单阳管-1至-5，调节其中的APC、PE、FITC、APC-Cy7、PE-Cy7、Percp5.5通道的电压及各荧光通道之间的补偿,参数设置为：前向散射光电压为286伏，侧向散射光电压为451伏，APC通道的电压为478伏，PE通道的电压为500伏，FITC通道的电压为464伏，APC-Cy7通道的电压为507伏，PE-Cy7通道的电压为615伏，Percp5.5通道的电压为625伏，FITC-％APC的补偿为0,PE-％APC的补偿为0,APCCy7-％APC的补偿为7.2,PECy7-％APC的补偿为0,Percp5.5-％APC的补偿为1.5,FITC-％PE的补偿为0.6,APCCy7-％PE的补偿为0,PECy7-％PE的补偿为0,PercpCy5.5-％PE的补偿为13.5,APCCy7-％FITC的补偿为0,PECy7-％FITC的补偿为0.1,Percp5.5-％FITC的补偿为2.3,PECy7-％APCCy7的补偿为2.6,PercpCy5.5-％APCCy7的补偿为0.8,Percp5.5-％PECy7的补偿为8.9； 8在所述B2中，取出A所得血液样本200ul置于流式管中，共分三管，按照如下根据II不同血小板淋巴细胞聚集体的检测，Ⅲ不同血小板粒细胞聚集体的检测、Ⅳ不同血小板单核细胞聚集体的检测，加入针对表面特定分子的荧光标记抗体； II，如下：取出A所得血液样本200ul置于流式管中，加入FITCCD3抗体、PECD61抗体、APCCD19抗体、APCCy7CD8抗体、PECy7CD56抗体、Percp5.5CD4抗体； Ⅲ，如下：取出A所得血液样本200ul置于流式管中，加入FITCCCR3抗体、PECD61抗体、APCFcεRIα抗体、APCCy7CD11b抗体、PECy7CD15抗体、Percp5.5CD16抗体； Ⅳ，如下：取出A所得血液样本200ul置于流式管中，加入FITCCD62P抗体、PECD61抗体、APCCD14抗体、Percp5.5CD16抗体； 9在所述B2中，ⅡⅢⅣ加入针对表面特定分子的荧光标记抗体后，避光孵育20分钟，加入红细胞裂解液各2ML继续避光孵育8分钟，离心1500rpmmin共5min,离心去除上清后，各加入PBS缓冲液2ml,同转速继续离心5min后去上清，加入200mlPBS缓冲液重悬后，上机检测； 10在所述B2中，将上机检测结果记录保存，使用Flowjo软件进行数据分析，记录各血小板白细胞聚集体百分比水平以及血小板白细胞聚集体上的血小板平均荧光强度。

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