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龙图腾网获悉浙江熙正霖生物科技有限公司申请的专利通过酶催化制备（β,S）构型玻色因的方法及工程菌获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119144635B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-27发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411616728.7，技术领域涉及：C12N15/70；该发明授权通过酶催化制备（β,S）构型玻色因的方法及工程菌是由罗茂行;董洪钢;刘迎宾;李舜;王甜忆设计研发完成，并于2024-11-13向国家知识产权局提交的专利申请。

本通过酶催化制备（β,S）构型玻色因的方法及工程菌在说明书摘要公布了：本发明提供了一种通过酶催化制备（β,S）构型玻色因的方法及工程菌，属于生物合成领域，本发明的工程菌以大肠杆菌BL21（DE3）为出发菌株，引入了SEQIDNo.1所示的改进羰基还原酶编码基因和SEQIDNo.2所示的改进甲酸脱氢酶编码基因。本发明利用该菌株生产的酶制备羰基还原酶LsADH和甲酸脱氢酶PsFDHmut共固定化酶进行（β,S）构型玻色因的酶催化合成，催化反应选择性高，可在常温常压中性环境中进行，共固定化酶可重复使用，有利于连续化生产和降低成本。本发明所采用的催化反应转化率＞99%，使用的底物β‑丙酮木糖苷和甲酸钠安全性高，显著的提高了产物（β,S）玻色因的合成效率。

本发明授权通过酶催化制备（β,S）构型玻色因的方法及工程菌在权利要求书中公布了：1.一种酶催化制备（β,S）构型玻色因的方法，其特征在于，包括如下步骤： 1）对工程菌进行培养，对培养后菌体进行破碎，分离纯化得到羰基还原酶LsADH和甲酸脱氢酶PsFDHmut； 所述工程菌采用如下方法构建： S1：设计序列如SEQIDNo.1所示的改进羰基还原酶编码基因；设计序列如SEQIDNo.2所示的改进甲酸脱氢酶编码基因；将改进羰基还原酶编码基因和改进甲酸脱氢酶编码基因插入载体pET-28a+的第5070位和第5234位之间，且改进羰基还原酶编码基因位于改进甲酸脱氢酶编码基因的上游，获得重组载体pET-28a（+）-Lsadh-Psfdh mut ； S2：将重组载体pET-28a（+）-Lsadh-Psfdh mut 热激转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，得到共表达羰基还原酶Lsadh和甲酸脱氢酶Psfdh mut 的重组菌株BL21（DE3）pET-28a（+）-Lsadh-Psfdh mut ，即所述工程菌； 2）配制海藻酸钠溶液，加入所得羰基还原酶LsADH和甲酸脱氢酶PsFDHmut酶液，其中羰基还原酶与甲酸脱氢酶的酶活之比为1:1~1:2，双酶终浓度之和为2~5mgmL； 将上述混合酶液滴加到与混合酶液等体积的壳聚糖和氯化钙混合溶液中，进行搅拌形成凝胶小球，再将凝胶小球静置固化，制得羰基还原酶LsADH和甲酸脱氢酶PsFDHmut共固定化酶； 3）利用包含所述共固定化酶的反应体系进行（β,S）构型玻色因的制备，反应条件为搅拌转速300~500rpm，反应温度35~40℃，反应时间6~8h； 反应体系包含磷酸氢二钾-磷酸二氢钾缓冲液10~50mM、15~30gL共固定化酶、800~1000mMβ-丙酮木糖苷、1.5~2.5mM甲酸钠、0.5~1mM辅酶NADP+。

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