优环(苏州)生物医药科技有限公司戴东升获国家专利权
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龙图腾网获悉优环(苏州)生物医药科技有限公司申请的专利一种基于核酶自剪接的无残留序列环状RNA及其制备方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119040364B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-27发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411203897.8,技术领域涉及:C12N15/63;该发明授权一种基于核酶自剪接的无残留序列环状RNA及其制备方法是由戴东升;胡万辰;单琳;戴紫琳设计研发完成,并于2024-08-29向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于核酶自剪接的无残留序列环状RNA及其制备方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于核酶自剪接的无残留序列环状RNA及其制备方法,属于分子生物学领域。该环状RNA由DNA分子制备而成,该DNA分子包括从5’到3’按以下顺序可操作地连接和排列的元件:启动子;polyX片段,包含大于5个相同的连续碱基;I型内含子片段;和目标片段;其中I型内含子核酶能够在一步酯交换反应中启动剪切,使得由DNA分子转录得到的线性RNA被配置为可以自环化以产生环状RNA,环状RNA只含有目标片段对应的RNA,从而避免额外使用已知可以促进剪切的内含子两端的野生型外显子残基,而不会残留外显子序列。解决了现有技术中环状RNA残留外显子的技术问题。该环状RNA可用于疾病的诊断和治疗。
本发明授权一种基于核酶自剪接的无残留序列环状RNA及其制备方法在权利要求书中公布了:1.一种用于制备环状RNA的DNA分子,包括从5’到3’按以下顺序可操作地连接和排列的元件: 启动子,所述启动子中从转录起始位点转录到线性RNA中的序列中从5’端到3’端的第三个碱基为G,所述启动子为T7启动子、SP6启动子和T3启动子中的一种; polyX片段,所述polyX片段包含大于5个相同的连续碱基,X表示A、T、C、G任一碱基; I型内含子片段,所述I型内含子由P2到P9结构域组成; 目标片段; 第一接头序列和第二接头序列,所述第一接头序列位于所述目标片段的3’端,所述第二接头序列位于所述目标片段的5’端;其中 所述第一接头序列对应的RNA的最后一个碱基为U,以与所述从转录起始位点转录到所述线性RNA中的序列中第三个碱基G形成G·U摇摆配对,所述第一接头序列对应的RNA中A和U的数量占所述第一接头序列的总碱基数的百分比大于第一预设值,或 所述第一接头序列和所述第二接头序列对应的RNA形成互补结构,所述互补结构中至少有2个碱基对完全互补;其中 I型内含子核酶能够在一步酯交换反应中启动剪切,使得由所述DNA分子转录得到的线性RNA被配置为可以自环化以产生环状RNA,所述环状RNA只含有所述目标片段对应的RNA。
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