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龙图腾网获悉江苏南农高科技股份有限公司;南京农业大学申请的专利一种间接ELISA方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116338181B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-27发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310292571.6，技术领域涉及：G01N33/569；该发明授权一种间接ELISA方法是由高新乐;李玉峰;耿琰;车巧林;缪芬芳;胡静雅设计研发完成，并于2023-03-23向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种间接ELISA方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种间接ELISA方法，所述间接ELISA方法用于检测猪血清样品中的ApxI毒素抗体水平，所述间接ELISA方法包括如下步骤：步骤S1：准备抗原；步骤S2：确定所述ELISA方法的条件；步骤S3：测定阳性标准品获得OD450nm的平均值X和标准差S，确定所述间接ELISA方法的阴阳性临界值；步骤S4：测定待测样品。本发明通过对抗原包被浓度、血清稀释度和作用时间、酶标二抗稀释浓度和作用时间、抗原抗体结合时间、封闭时间、底物显色时间等条件的优化，使其能有效的检测免疫APP疫苗后血清抗体。

本发明授权一种间接ELISA方法在权利要求书中公布了：1.一种间接ELISA方法，其特征在于，所述间接ELISA方法用于检测猪血清样品中的ApxI毒素抗体水平，所述间接ELISA方法包括如下步骤： 步骤S1：准备抗原，所述抗原由Rosetta-pColdI-sumo-AI2表达后纯化所得；所述抗原的氨基酸残基序列为SEQIDNO.2； 步骤S2：确定所述ELISA方法的条件，所述条件包括：抗原包被浓度为1μgmL、血清稀释度为1:160、包被条件为4℃过夜、封闭液为5％脱脂乳、封闭条件为37℃3h、血清作用条件为37℃1h、酶标抗体稀释度为1:15000、酶标抗体的作用条件为37℃30min和显色时间为37℃10min； 步骤S3：测定阳性标准品获得OD450nm的平均值X和标准差S，确定所述间接ELISA方法的阴阳性临界值，所述阴阳性临界值包括阳性临界值和阴性临界值，所述阳性临界值为X+3S，所述阴性临界值为X+2S； 步骤S4：测定待测样品，若待测样品的OD450nm的值大于等于阳性临界值时，则判定所述待测样品为阳性；若待测样品的OD450nm的值小于阳性临界值并且大于等于阴性临界值时，则判定所述待测样品为可疑；若待测样品的OD450nm的值小于阴性临界值时，则判定所述待测样品为阴性。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人江苏南农高科技股份有限公司;南京农业大学，其通讯地址为：214400 江苏省无锡市江阴市南闸镇锡澄路890号；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。