天津市动物疫病预防控制中心魏俊利获国家专利权
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龙图腾网获悉天津市动物疫病预防控制中心申请的专利用于虾肝肠胞虫分离纯化、染色及计数的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116256211B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-27发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211596672.4,技术领域涉及:G01N1/30;该发明授权用于虾肝肠胞虫分离纯化、染色及计数的方法是由魏俊利;孙妍;董学旺;陈浩楠;刘群;张丽;王健春设计研发完成,并于2022-12-12向国家知识产权局提交的专利申请。
本用于虾肝肠胞虫分离纯化、染色及计数的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了用于虾肝肠胞虫分离纯化、染色及计数的方法。该方法包括以下步骤:制样:解剖感染虾肝肠胞虫的对虾肝胰腺和肠道组织,制成组织匀浆液用无菌生理盐水稀释得稀释匀浆液;粗提:采用差速离心法将所得稀释匀浆液制成肝肠胞虫粗提液;粗提步骤中所用洗涤介质包括丙三醇;提纯:采用不连续蔗糖密度梯度离心法对步骤S2所得肝肠胞虫粗提液进行分离提纯,得纯化的肝肠胞虫悬浮液;染色:采用荧光增白剂对所得纯化的肝肠胞虫悬浮液中的肝肠胞虫进行染色;计数:将染色后的肝肠胞虫过滤到黑色核孔滤膜上,在荧光显微镜高倍镜下进行观察计数。该方法具有操作简便、成本低廉、病原纯度高、染色剂特异性强,计数准确的优点。
本发明授权用于虾肝肠胞虫分离纯化、染色及计数的方法在权利要求书中公布了:1.一种用于虾肝肠胞虫分离纯化、染色及计数的方法,其特征在于,包括以下步骤: 制样:解剖感染虾肝肠胞虫的对虾肝胰腺和肠道组织,制成组织匀浆液用无菌生理盐水稀释得稀释匀浆液; 粗提:采用差速离心法将所得稀释匀浆液制成肝肠胞虫粗提液;粗提步骤中所用洗涤介质包括丙三醇; 提纯:采用不连续蔗糖密度梯度离心法对步骤S2所得肝肠胞虫粗提液进行分离提纯,得纯化的肝肠胞虫悬浮液; 染色计数:用荧光增白剂对所得纯化的肝肠胞虫悬浮液中的肝肠胞虫进行染色,并将染色后的肝肠胞虫过滤到黑色核孔滤膜上,在荧光显微镜高倍镜下进行观察计数。
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