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龙图腾网获悉重庆医科大学国际体外诊断研究院申请的专利一种高通量单细胞全长转录组测序文库的构建方法和试剂盒以及测序方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114737258B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-27发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210481013.X，技术领域涉及：C40B50/06；该发明授权一种高通量单细胞全长转录组测序文库的构建方法和试剂盒以及测序方法是由邹远设计研发完成，并于2022-05-05向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种高通量单细胞全长转录组测序文库的构建方法和试剂盒以及测序方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种高通量单细胞全长转录组测序文库的构建方法和试剂盒以及测序方法，涉及基因测序技术领域。本发明采用了在结合液滴微流控技术、拆分与组合技术以及高通量测序的技术上，创造性地采用特定标签的方法实现了同时对10～107个单细胞全长转录组的高通量测序分析，解决了大规模单细胞全长转录组测序的技术难题，修改并完善了现有单细胞转录组测序技术，降低了测序的成本，提高了检测的通量。

本发明授权一种高通量单细胞全长转录组测序文库的构建方法和试剂盒以及测序方法在权利要求书中公布了：1.一种高通量单细胞全长转录组测序文库的构建方法，其特征在于，其包括： 利用液滴微流控技术对n个待分析细胞进行单细胞捕获并包装，n为正整数且≥10，生成包含单个细胞和mRNA捕获探针的水凝胶微球，对所述水凝胶微球中的单细胞进行裂解和mRNA反转录，获得mRNA的反转录产物：全长cDNA； 将n个所述水凝胶微球分为x份，x为正整数且＜n，对每一份水凝胶微球采用随机引物对将全长cDNA延伸为多个二链cDNA片段，形成全长cDNA与二链cDNA片段的杂交嵌合体，每一份水凝胶微球的随机引物上标记有不同的特异性标签，随后将x份水凝胶微球合并成一份； 在所有水凝胶微球的标签上进行k次标记新的特异性标签的步骤，以形成多级标签，当所述多级标签的种类≥n时，停止标记； 采用具有链取代活性的聚合酶将所有水凝胶微球中二链cDNA片段延伸并取代下来，对取代后获得的产物进行扩增，获得测序文库； 每次进行所述标记新的特异性标签的步骤包括：将x份水凝胶微球混合后重新分成y份，y为正整数且＜n，然后分别在每一份水凝胶微球中随机引物的标签上标记不同的特异标签以形成多级特异标签；y份水凝胶微球的分配方式为平均分配；y与x相等； 在水凝胶微球中随机引物的标签上标记不同的特异标签以形成多级特异标签的步骤包括：在水凝胶微球中添加连接酶、含有标签序列的连接探针； 所述连接探针为核酸序列，包含3个相连的部分：第一序列、标签序列和第二序列，所述第一序列为用于与二链cDNA片段上的已有的连接探针相互杂交的序列，所述第二序列为用于与后续的连接探针相互杂交的序列； 所述在水凝胶微球中随机引物的标签上标记不同的特异标签以形成多级特异标签的步骤还包括在水凝胶微球中添加连接子，所述第一序列通过所述连接子与二链cDNA片段上的已有的连接探针相互杂交，所述第二序列通过所述连接子与后续连接探针上的第一序列相互杂交； 所述标记新的特异性标签的反应条件如下：所述连接酶的作用浓度为1~5unitμL；所述连接探针的作用浓度为0.5~15μM，反应时间为0.5~2.5h； 进行第k次标记新的特异性标签时，所述连接探针上还包括有分子标签UMIs。

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