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龙图腾网获悉上海百英生物科技股份有限公司申请的专利一种基于B细胞永生化的单个B细胞抗体开发方法及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119285758B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-01发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411540545.1，技术领域涉及：C07K16/00；该发明授权一种基于B细胞永生化的单个B细胞抗体开发方法及其应用是由卢海松;王辉;林施聘;包黎明设计研发完成，并于2024-10-31向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于B细胞永生化的单个B细胞抗体开发方法及其应用在说明书摘要公布了：本发明具体涉及一种基于B细胞永生化的单个B细胞抗体开发方法及其应用。本发明提供的方法，包括以下步骤：S1、抗原的准备；S2、抗原免疫；S3、慢病毒载体的改造；S4、病毒的感染及细胞的分选；S5、筛选高结合活性细胞；S6、抗体序列测序；S7、目标抗体的活性验证等步骤。本发明提供了一种全新的抗体开发方法，有效地解决了单个B细胞抗体开发需要大量重组表达，验证成本高的问题，通过单个B细胞技术结合B细胞的永生化技术，采用改造后的慢病毒感染B细胞，使细胞实现永生化，能够体外增值并分泌抗体，其次，将高通的微流控筛选和细胞永生化技术结合起来，直接在油滴中进行细胞的感染，实现了抗体开发的高通量低成本。

本发明授权一种基于B细胞永生化的单个B细胞抗体开发方法及其应用在权利要求书中公布了：1.一种基于B细胞永生化的单个B细胞抗体开发方法，其特征在于，通过单个B细胞微流控技术实现细胞的初步富集，再结合B细胞永生化技术进一步筛选，包括以下步骤： S1、抗原的准备 依据目标抗原蛋白序列和基因序列信息，表达抗原并在其C端融合表达humanFc-tag或者Histag，表达纯化后，用于后续小鼠免疫； 对目标抗原蛋白进行荧光标记，用于微流控筛选； S2、抗原免疫 将目标抗原对动物进行免疫，诱导动物体内产生针对该抗原的特异性B细胞，进而产生抗体分泌型浆细胞； S3、慢病毒载体的改造 通过将B细胞表面的受体抗体融合VSV-G蛋白包装到慢病毒的表面，将BCL和BCL6基因通过基因重组与克隆技术包装到慢病毒中，制得包装好的慢病毒载体； S4、病毒的感染及细胞的分选 将S3制得的包装好的慢病毒载体按照MOI=5~20加到步骤S2制得的浆细胞中，浆细胞浓度0.5E6mL~1.5E6mL，慢病毒载体和浆细胞通过微流控仪器包裹到油滴中，油滴中同时还有荧光标记的目标抗原和抗小鼠的荧光二抗，孵育后分选出抗体阳性的浆细胞； 将抗体阳性的细胞分选到96孔细胞培养板中，细胞培养12~16天后检测上清中抗体活性； S5、筛选高结合活性细胞 通过过表达细胞结合试验筛选出高结合活性细胞； S6、抗体序列测序 扩增步骤S5中筛选获得的高结合活性细胞中的抗体序列，轻重链分别克隆到T载体中，测序后最终获得抗体的序列； S7、目标抗体的活性验证 对目标抗体的活性进行检测和验证； 步骤S3中所述将BCL和BCL6基因通过基因重组与克隆技术包装到慢病毒中包括： 慢病毒的包装：首先，构建包装载体1，其中，包装载体1为慢病毒囊膜蛋白VSV-G融合抗小鼠CD19的抗体，其氨基酸序列如下SEQIDNO.1所示；其次，将BCL和BCL6基因构建到穿梭质粒2中，BCL和BCL6通过P2A连接，由此，穿梭质粒2携带小鼠转录因子BCL和BCL6，其氨基酸序列如下SEQIDNO.2所示；包装载体3为表达gagpol基因的包装载体。

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