南京林业大学李达获国家专利权
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龙图腾网获悉南京林业大学申请的专利一株防治松材线虫的工程菌株及其构建方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119193653B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-04发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411383886.2,技术领域涉及:C12N15/78;该发明授权一株防治松材线虫的工程菌株及其构建方法和应用是由李达;叶建仁设计研发完成,并于2024-09-30向国家知识产权局提交的专利申请。
本一株防治松材线虫的工程菌株及其构建方法和应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一株防治松材线虫的工程菌株及其构建方法和应用,涉及微生物技术领域。本发明公开的一株防治松材线虫的工程菌株的构建方法,将oprL启动子、SD序列及Peptidase03基因序列构建到改造载体pBBR1MCS2‑Tac‑EGFP中,得到重组质粒pBBR1MCS2‑P03;将质粒pBBR1MCS2‑P03转化到受体菌BM06中,获得工程菌BM06‑P03;Peptidase03基因序列如SEQIDNO.1所示;oprL启动子的序列如SEQIDNO.4所示;SD序列如SEQIDNO.5所示本发明构建的工程菌株BM06‑P03延缓了马尾松的发病速度,并起到松材线虫防治效果。
本发明授权一株防治松材线虫的工程菌株及其构建方法和应用在权利要求书中公布了:1.一株防治松材线虫的工程菌株的构建方法,其特征在于,具体步骤为: 1)参考恶臭假单胞菌KT2440菌株的oprL基因序列GenBankAAN66847设计引物oprL-F:5’-ACTACAACGCCAACCCGAAGCTGTC-3’,oprL-R:5’-TGAAACTCCTAATGAACCCCAGTGT-3’,提取韩国假单胞菌的基因组DNA,通过PCR法获得oprL基因启动子; 所述oprL启动子的序列如SEQIDNO.4所示; 2)将oprL启动子、SD序列及Peptidase03基因序列插入改造载体pBBR1MCS2-Tac-EGFP的EcoRI和HindIII酶切位点中,获得载体pBBR1MCS2-P03,提取质粒pBBR1MCS2-P03; 所述SD序列如SEQIDNO.5所示; 所述Peptidase03基因序列如SEQIDNO.1所示; 3)将质粒pBBR1MCS2-P03转化至DH5α,挑取阳性克隆再次提取pBBR1MCS2-P03质粒转化到受体菌韩国假单胞菌PseudomonaskoreensisBM06中,获得重组工程菌株BM06-P03; 所述韩国假单胞菌PseudomonaskoreensisBM06的保藏编号为:CCTCCNO:M20241926。
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