南京农业大学三亚研究院冯致科获国家专利权
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龙图腾网获悉南京农业大学三亚研究院申请的专利一种基于GSH-DTNB显色高通量快速检测谷胱甘肽硫转移酶对除草剂代谢活性的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119552944B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-11发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510121935.3,技术领域涉及:C12Q1/48;该发明授权一种基于GSH-DTNB显色高通量快速检测谷胱甘肽硫转移酶对除草剂代谢活性的方法是由冯致科;韦建国;张战战;班雅欣设计研发完成,并于2025-01-26向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于GSH-DTNB显色高通量快速检测谷胱甘肽硫转移酶对除草剂代谢活性的方法在说明书摘要公布了:本发明公开一种基于GSH‑DTNB显色高通量快速检测谷胱甘肽硫转移酶对除草剂代谢活性的方法,该方法为:取纯化GST蛋白和除草剂溶液,以GSH溶液作为反应起始剂启动反应,孵育后,加入DTNB溶液作为反应终止剂终止反应得到反应体系;以等体积的纯化洗脱液替代所述反应体系中的纯化GST蛋白作为空白对照体系;检测所述反应体系和空白对照体系的A412吸光值,定量反应体系和空白对照体系中的GSH浓度并计算谷胱甘肽硫转移酶对除草剂的代谢率。该方法不仅提高了检测效率和准确性,还降低了检测成本,为后续更多基于GSH‑DTNB的快速检测方法开发提供了重要参考。
本发明授权一种基于GSH-DTNB显色高通量快速检测谷胱甘肽硫转移酶对除草剂代谢活性的方法在权利要求书中公布了:1.一种基于GSH-DTNB显色高通量快速检测谷胱甘肽硫转移酶GST对除草剂代谢活性的检测体系,其特征在于,该检测体系包括反应体系和空白对照体系,所述的反应体系包含:189μL0.25mgmL纯化GST蛋白,1μL50mM除草剂溶液,以10μL5mMGSH溶液启动反应,29-31℃黑暗孵育后,加入10μL20mMDTNB溶液作为反应终止剂;以189μL纯化洗脱液替代所述反应体系中的纯化GST蛋白作为空白对照; 所述的除草剂溶液以DMSO作为溶剂,所述的GSH溶液以ddH2O作为溶剂,所述的DTNB溶液以DMSO作为溶剂; 所述的纯化洗脱液为含50mM咪唑,50mMNaH2PO4,300mMNaCl,pH=7.5的盐溶液; 所述的除草剂为氯乙酰胺类除草剂、芳氧苯氧基丙酸酯类除草剂、二氯喹啉草酮、解草啶、苯磺隆、2,4-D、环吡氟草酮、砜嘧磺隆、甲基二磺隆、二氯喹啉酸、敌稗、甲氧咪草烟、吡嘧磺隆、环磺酮、五氟磺草胺、异丙隆、氯吡嘧磺隆、硝磺草酮、苄嘧磺隆、烟嘧磺隆、咪唑乙烟酸、磺草酮、精喹禾灵和氟磺隆中的至少一种。
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