中国人民解放军海军军医大学张磊获国家专利权
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龙图腾网获悉中国人民解放军海军军医大学申请的专利一种从头合成木脂素苷的酵母互利共生群落及其构建方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118995462B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-11发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411314102.0,技术领域涉及:C12N1/19;该发明授权一种从头合成木脂素苷的酵母互利共生群落及其构建方法和应用是由张磊;陈瑞兵;陈祥慧;杨瑾冬设计研发完成,并于2024-09-20向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种从头合成木脂素苷的酵母互利共生群落及其构建方法和应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种从头合成木脂素苷的酵母互利共生群落及其构建方法和应用,涉及合成生物学技术领域,其技术方案要点是本发明首次构建酿酒酵母共生群落,利用简单碳源异源从头合成了植物来源的复杂抗病毒活性木脂素苷。前期构建高产阿魏酸和高效转化阿魏酸合成木脂素苷的酿酒酵母细胞工厂,在两个细胞工厂中分别构建蛋氨酸和腺苷营养缺陷,实现最佳缺陷对组成共生群落,成功实现以葡萄糖为唯一碳源从头合成抗病毒活性木脂素苷,包括直铁线莲宁B、松脂素单糖苷和松脂素双糖苷。本发明应用微生物共生群落一步合成木脂素苷,为后续利用互惠共生的酿酒酵母菌群合成其他高价值复杂活性成分提供了强有力的研究和应用基础。
本发明授权一种从头合成木脂素苷的酵母互利共生群落及其构建方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种从头合成木脂素苷的酵母互利共生群落的构建方法,其特征是:所述酵母互利共生群落以酿酒酵母CEN.PK113-11C*为底盘菌株,所述酵母互利共生群落由木脂素苷合成的上游模块的工程菌和木脂素苷合成的下游模块的工程菌组成; 所述木脂素苷合成的上游模块的工程菌通过如下方法得到: 在基因型为MATa,MAL2-8C,SUC2,ura3Δ,his3Δ,gal80Δ,XI5::P TEF -CAS9-T CYC1 ,aro10Δ, ARO10::T HIS3 ScARO7 G141S-ScOPT1P GAL101 ScARO4 K229L-ScOPT1T ENO2 +P GAL7 EcAROLT ADH1 ,pdc5Δ, PDC5::T CYC1 FjTAL-ScOPT1P GAL101 SbPAL1-ScOPT1T TDH2 +T FBA1 AtCPR1-ScOPT1P GAL7 ,XII4::T PRM9 PtrC4H2-ScOPT1P GAL101 PtrC4H1-ScOPT1T PYK +P GAL7 PtrC3H3-ScOPT1T DIT1 ,X2::T PRM9 PaHPAB-ScOPT1P GAL101 SeHPAC-ScOPT1T HIS3 , XII1::P GAL7 ScARO1T ENO2 +T CPS1 ScARO2P GAL101 ScARO3T HIS5 ,gpp1Δ, GPP1::TENO2T ENO2 CkPTA-ScOPT1P GAL101 LmXFPK-OpOPT1T HIS5 ,XII5::T CPS1 NtCOMT1-ScOPT1P GAL101 NtCOMT1-OpOPT1T HIS5 , XI8::T CPS1 NtCOMT1-ScOPT1P GAL101 NtCOMT1-OpOPT1T HIS5 , XI7::T PRM9 P GAL10 ScTAL1T PYK1 ,I16::P GAL7 ScTKL1T ENO2 ,hoΔ, T HSP26 ScMET6P GAL101 MTFHR chimera1-ScOPT1T PDC6 +P GAL7 LiMETK1-ScOPT1T UBX6 , V3::T PRM9 ScADO1P GAL10 1ScSAH1T PYK1 高产阿魏酸的工程菌RB218基因组中敲除MET15基因且过表达e-GFP荧光蛋白编码基因后得到工程菌RB218 met15Δ ; 所述木脂素苷合成的下游模块的工程菌通过如下方式得到: 在基因型为MATa,MAL2-8C,SUC2,ura3Δ,his3Δ,gal80Δ, XI5::P TEF -CAS9-T CYC1 ,XII1::P GAL7 Ptr4CL5-ScOPT1T ENO2 +T CPS1 ScADH6P GAL101 PtrCCR2-ScOPT1T HIS5 饲喂阿魏酸发酵时高产松柏醇的工程菌RB57基因组中敲除ADE2基因且过表达mPlum荧光蛋白后得到工程菌RB57 ade2Δ ; 所述的木脂素苷为松柏醇,从头生产松柏醇时,保证种子菌液初始总OD600为0.2,以1:1初始接种比例分别接种工程菌RB218 met15Δ 和工程菌RB57 ade2Δ 于20mlDelft发酵培养基中,进行144小时互利共培养。
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