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龙图腾网获悉湖北跃海生物科技有限公司申请的专利柱前衍生-高效液相色谱测定大米肽中氨基酸含量的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115792053B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-11发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211530375.X，技术领域涉及：G01N30/06；该发明授权柱前衍生-高效液相色谱测定大米肽中氨基酸含量的方法是由陈曦;刘嵬;余波;杨晓;黄晶;黄莹;胡武瑶设计研发完成，并于2022-11-30向国家知识产权局提交的专利申请。

本柱前衍生-高效液相色谱测定大米肽中氨基酸含量的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种柱前衍生‑高效液相色谱测定大米肽中氨基酸含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤S1、标准溶液的制备；步骤S2、水解氨基酸和游离氨基酸的制备；步骤S3、样品的衍生；步骤S4、柱前衍生‑高效液相色谱测定，本发明以PITC为柱前衍生剂，结合紫外检测器定量检测16种氨基酸含量。该方法操作简便、快速、干扰小、衍生物稳定、应用广泛，为快速分析多种氨基酸提供了良好的途径。

本发明授权柱前衍生-高效液相色谱测定大米肽中氨基酸含量的方法在权利要求书中公布了：1.一种柱前衍生-高效液相色谱测定大米肽中氨基酸含量的方法，其特征在于，包括以下步骤： 步骤S1、标准溶液的制备 分别量取16种氨基酸的混合标准溶液，并用盐酸溶液稀释成不同浓度的标准溶液，制备成标准曲线； 步骤S2、水解氨基酸和游离氨基酸的制备 制备得到水解氨基酸和游离氨基酸； 步骤S3、样品的衍生 利用异硫氰酸苯酯乙腈溶液和三乙胺乙腈溶液对样品进行衍生处理； 步骤S4、柱前衍生-高效液相色谱测定 色谱柱：AthenaAAA4.6×250mm，5μm； 柱温：30-40℃； 流速：0.8-1.2mLmin； 检测波长：254nm； 进样量：5μL； 流动相A：甲醇:乙腈:水＝20:60:20；流动相B：50mmolL乙酸钠溶液，洗脱梯度如下所示， 步骤S2、水解氨基酸和游离氨基酸的制备，具体包括以下操作： 步骤S21、水解氨基酸的制备 称取大米肽样品80.00mg放入水解管中，加入含0.1％苯酚6molL盐酸10mL，将水解管在充氮2～3min，然后对水解管进行封口处理； 将已封口的水解管放在165℃的恒温箱中水解1h，取出冷却至室温； 打开水解管，将水解液转移至100mL容量瓶内，用少量水多次冲洗水解管，水解液移入同一100mL容量瓶内，定容，过滤； 吸取3mL滤液移入试管中，在60℃氮吹条件下吹干，用1mL超纯水完全溶解后转移至1.5mL离心管中，备用； 步骤S22、游离氨基酸的制备 称取样品300.00mg，用0.1molL盐酸定容至10mL容量瓶中，过滤，备用； 所述16种氨基酸分别为天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、组氨酸、精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸以及赖氨酸。

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