南京师范大学朱丹获国家专利权
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龙图腾网获悉南京师范大学申请的专利一种膜Ⅰ型基质金属蛋白酶活性检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN114965426B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-11发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210533617.4,技术领域涉及:G01N21/65;该发明授权一种膜Ⅰ型基质金属蛋白酶活性检测方法是由朱丹;李安然;史经展;汪弋平设计研发完成,并于2022-05-17向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种膜Ⅰ型基质金属蛋白酶活性检测方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种膜Ⅰ型基质金属蛋白酶活性检测方法,首先利用多肽序列构建出拉曼‑荧光双模式的探针粒子,然后将探针加入到细胞样品中,通过膜Ⅰ型基质金属蛋白酶对多肽序列的特异性切割作用产生拉曼信号和荧光信号之间的切换,实现细胞内膜Ⅰ型基质金属蛋白酶活性的可视化,最后采集细胞内的拉曼光谱和荧光光谱,建立起信号强度与膜Ⅰ型基质金属蛋白酶活性之间的对应关系,达到半定量分析的目的。本发明采用拉曼‑荧光开关型检测方法能够有效降低背景信号的干扰,具有灵敏度高、特异性好和可靠性强等优点。
本发明授权一种膜Ⅰ型基质金属蛋白酶活性检测方法在权利要求书中公布了:1.一种膜Ⅰ型基质金属蛋白酶活性检测方法,其特征在于:包括下述步骤: 1)制备金属纳米颗粒作为表面增强拉曼散射衬底; 2)在颗粒表面修饰功能性多肽序列,得到拉曼-荧光双模式探针;所述的功能性多肽序列为CGPLGLGK,该多肽序列通过N端半胱氨酸的巯基共价地连接到金属纳米颗粒表面;所述的功能性多肽序列C端修饰荧光拉曼分子,荧光拉曼分子为罗丹明6G、罗丹明B、羧基荧光素、甲基荧光素或花氰素5中的一种; 3)将探针加入到待测细胞中,与膜Ⅰ型基质金属蛋白酶发生反应; 4)利用共焦拉曼显微镜分析待测细胞上的拉曼与荧光信号,进行光谱与图像的采集,根据拉曼与荧光信号强度的变化,实现对膜Ⅰ型基质金属蛋白酶活性的半定量检测。
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