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龙图腾网获悉昆明医科大学申请的专利一种大鼠嗅球神经元体外培养方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119351332B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-15发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411932182.6，技术领域涉及：C12N5/0793；该发明授权一种大鼠嗅球神经元体外培养方法是由邹英鹰;白子涵;黄锴;龚一成;朱萌;沈旺寻;赵桢松设计研发完成，并于2024-12-26向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种大鼠嗅球神经元体外培养方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种大鼠嗅球神经元体外培养方法，属于细胞培养领域。本发明使用滚动剥离法剥离大鼠脑膜得到嗅球，经洗涤、剪碎、使用DNaseⅠ酶和木瓜蛋白酶消化、离心、重悬、过滤后贴壁培养得到大鼠嗅球神经元。本发明操作简单，重复性好，节约时间和实验成本，培养的嗅球神经元分布均匀，稳定性好，活性高，体外存活时间长。

本发明授权一种大鼠嗅球神经元体外培养方法在权利要求书中公布了：1.一种大鼠嗅球神经元体外培养方法，包括以下步骤： S1提前用多聚-D-赖氨酸包被细胞培养板爬片，配置所需种板培养液和维持培养液；所述的种板培养液的成分为DMEM基础培养基、1%青霉素链霉素、10%血清；所述的维持培养液的成分为Neurobasal基础培养基、0.5%青霉素链霉素、2%B27和5%谷氨酰胺； S2取材、清洗 取SD大鼠幼崽剥离头骨取出完整嗅球及大脑，置于预冷的DMEM基础培养基中，显微镜下采用滚动法剥除嗅球脑膜，用DMEM基础培养基清洗；所述的滚动法剥除嗅球脑膜的具体步骤为：用眼科镊由嗅球与大脑连接处开始，用眼科镊尖端轻勾起脑膜向前向上提拉，连接处脑膜便被分离，同时剥离了部分嗅球表面上层脑膜，然后用镊子向下向前轻推嗅球，滚动嗅球离开嗅球表面下层脑膜，留下下层脑膜，滚动剥离后得到嗅球，全程在冰上操作； S3剪碎、消化、吹打 用眼科剪剪碎处理后的嗅球，向剪碎后的组织块中加入消化酶消化，使用种板培养液终止消化、吹打，吹打后吸出上层细胞悬液至离心管中；所述的消化酶为300μL0.2-0.3mgmLDNaseⅠ酶和1mL浓度为55-65UmL的木瓜蛋白酶的混合溶液； S4离心、重悬、过滤 将装有细胞悬液的离心管离心，弃离心后上清液，向沉淀中加入种板培养液完全重悬，将悬液经细胞筛过滤； S5计数、种板 计数后用种板培养液调整细胞密度；悬液混匀后种板，十字法摇板，双蒸水封板； S6换液、贴壁培养 种板后4-5小时更换维持培养液，后续每隔2天换一次维持培养液。

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