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山东阳成协盈生物技术有限责任公司贺雨婷获国家专利权

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龙图腾网获悉山东阳成协盈生物技术有限责任公司申请的专利一种生产L-乳酸的大肠杆重组菌株E.coli Lac、构建方法及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118956716B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-15发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411361069.7,技术领域涉及:C12N1/21;该发明授权一种生产L-乳酸的大肠杆重组菌株E.coli Lac、构建方法及其应用是由贺雨婷;于添池;刘冬冬;陈正;刘常乐设计研发完成,并于2024-09-27向国家知识产权局提交的专利申请。

一种生产L-乳酸的大肠杆重组菌株E.coli Lac、构建方法及其应用在说明书摘要公布了:本发明涉及一种生产L‑乳酸的大肠杆重组菌株E.coliLac、构建方法及其应用,属于生物工程领域,所述大肠杆菌重组菌株E.coliLac的构建方法:所述方法为以大肠杆菌基因重组菌株E.coliXZ132为出发菌株,获得BcldhL基因,所述BcldhL基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示,使用λ同源重组的方法使BcldhL基因替换出发菌株基因组中的ldhA基因,获得菌株E.colipldhA::BcldhL;再使用BcldhL基因替换出发菌株基因中的ppsA基因,获得菌株E.colipldhA::BcldhL‑pppsA::BcldhL,在质粒pTrc99a上插入BcldhL基因,获得质粒pTrc99a‑BcldL;制作菌株E.colipldhA::BcldhL‑pppsA::BcldhL的化学感受态并转化质粒pTrc99a‑BcldhL,获得菌株E.colipldhA::BcldhL‑pppsA::BcldhL‑pTrc::BcldhL,重新命名为E.coliLac。本发明还提供利用所述菌株发酵制备L‑乳酸的应用,本发明通过过表达高酶活的L‑乳酸脱氢酶基因,大幅度提高了乳酸产量。

本发明授权一种生产L-乳酸的大肠杆重组菌株E.coli Lac、构建方法及其应用在权利要求书中公布了:1.一种生产L-乳酸的大肠杆菌重组菌株E.coliLac,其特征在于,所述大肠杆菌重组菌株E.coliLac为E.colipldhA::BcldhL-pppsA::BcldhL-pTrc::BcldhL,所述E.colipldhA::BcldhL-pppsA::BcldhL-pTrc::BcldhL以大肠杆菌基因重组菌株E.coliXZ132为出发菌株,以SEQIDNO.1所示的L-乳酸脱氢酶基因BcldhL替代出发菌株中的乳酸脱氢酶A基因ldhA;同时BcldhL基因替代出发菌株中的磷酸烯醇式丙酮酸合成酶基因ppsA;同时出发菌株中导入了含有Trc启动子过表达L-乳酸脱氢酶的质粒ptrc99A-BcldhL;对获得的大肠杆菌重组菌株进行酸驯化和抗高盐度驯化,筛选耐酸和高盐度渗透胁迫的菌株,最终获得高产L-乳酸的菌株E.coliLac; 所述酸驯化为加入浓度梯度5-100gL的L-乳酸,以及浓度梯度5-100gL的D-乳酸进行驯化; 所述抗高盐度驯化为加入浓度梯度5-70gL的NaCl,筛选耐渗透胁迫的菌株。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人山东阳成协盈生物技术有限责任公司,其通讯地址为:272000 山东省济宁市高新区国家产学研基地H区3号楼;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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