中乔健工生物科技(广东)有限公司赖金林获国家专利权
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龙图腾网获悉中乔健工生物科技(广东)有限公司申请的专利一种模拟胰岛素缺陷微环境培养UCMSCs外泌体的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118853554B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-15发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411293571.9,技术领域涉及:C12N5/0775;该发明授权一种模拟胰岛素缺陷微环境培养UCMSCs外泌体的方法是由赖金林;罗华英设计研发完成,并于2024-09-14向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种模拟胰岛素缺陷微环境培养UCMSCs外泌体的方法在说明书摘要公布了:本申请公开了一种模拟胰岛素缺陷微环境培养UCMSCs外泌体的方法,涉及外泌体技术领域,其步骤具体包括:S1、建立胰岛素缺陷微环境;S2、UCMSCs接种于建立的模拟微环境中;培养温度为37℃,pH值为7.4,培养基每2‑3天更换一次,诱导UCMSCs分泌和释放外泌体,培养48‑72小时,在模拟胰岛素分泌缺陷微环境的培养基中培养至第3‑5代;收集培养上清;S3、将培养上清进行多次离心,并纯化外泌体;高糖环境可以模拟糖尿病患者体内的血糖水平,这种环境刺激细胞产生应激反应,从而改变其分泌外泌体的模式和内容,通过添加这些因子,模拟糖尿病环境,使外泌体中携带与治疗糖尿病相关的分子。
本发明授权一种模拟胰岛素缺陷微环境培养UCMSCs外泌体的方法在权利要求书中公布了:1.一种模拟胰岛素缺陷微环境培养UCMSCs外泌体的方法,其特征在于,其步骤具体包括: S1、建立胰岛素缺陷微环境; 模拟微环境具体为在无血清培养基中添加诱导因子和双层壳聚糖水凝胶; 诱导因子包括: 高糖环境:25mM葡萄糖; 脂质代谢异常:1mM棕榈酸; 胰岛素抵抗模拟:0.005mM瘦素; 氧化应激:培养环境的氧气条件为25%; 激素:0.01mM的炎症因子,炎症因子为白介素1-β; 双层壳聚糖水凝胶的制备方法包括: 将100重量份水的pH用氢氧化钠调节pH至10.5;升温至50℃,然后加入10重量份水溶性壳聚糖、3重量份羟乙基纤维素和0.5重量份氯化钠,混合均匀获得单层水凝胶; 将上单层水凝胶干燥研磨成颗粒过200目筛,后重新放置于100重量份水中并加入10重量份水溶性壳聚糖、3重量份羟乙基纤维素和0.5重量份氯化钠搅拌混合均匀,干燥后研磨成颗粒过100目筛即得双层壳聚糖水凝胶颗粒; S2、UCMSCs接种于建立的模拟微环境中,培养温度为37℃,pH值为7.4,培养基每2-3天更换一次,诱导UCMSCs分泌和释放外泌体,培养48-72小时,在模拟胰岛素分泌缺陷微环境的培养基中培养至第3-5代;收集培养上清; S3、将培养上清进行多次离心,并纯化外泌体。
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