江苏师范大学王亮获国家专利权
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龙图腾网获悉江苏师范大学申请的专利一种莱茵衣藻NPHP4蛋白的兔多克隆抗体及其制备方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119241698B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-15发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411285122.X,技术领域涉及:C07K16/14;该发明授权一种莱茵衣藻NPHP4蛋白的兔多克隆抗体及其制备方法和应用是由王亮;徐闯;蒋林;李亚;王苏慧;钱蕴瑶;吴怡琼;董周舟;苗宸羽设计研发完成,并于2024-09-13向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种莱茵衣藻NPHP4蛋白的兔多克隆抗体及其制备方法和应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种莱茵衣藻NPHP4蛋白的兔多克隆抗体及其制备方法和应用,NPHP4蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。制备方法:莱茵衣藻NPHP4蛋白抗原表位的分析与设计,选取859‑1058aa氨基酸片段构建原核细胞重组表达载体;将重组表达载体转入原核表达细胞中,获得重组表达菌株,诱导抗原蛋白表达;将纯化后的抗原蛋白作为免疫原,进行兔子免疫,获得NPHP4蛋白兔多克隆抗血清,并进一步纯化处理;纯化后的多克隆抗体可通过IF方法进行莱茵衣藻纤毛过渡区的标记验证,证明其可以用来进行纤毛过渡区特异性荧光标记;也可通过免疫印迹WB方法对莱茵衣藻NPHP4蛋白进行定性与定量分析。
本发明授权一种莱茵衣藻NPHP4蛋白的兔多克隆抗体及其制备方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种莱茵衣藻NPHP4蛋白的兔多克隆抗体,其特征在于,所述多克隆抗体能够特异性识别莱茵衣藻纤毛过渡区的NPHP4蛋白;所述NPHP4蛋白的氨基酸序列如序列表SEQIDNO.1所示;所述莱茵衣藻NPHP4蛋白的兔多克隆抗体的制备方法,包括以下步骤: (1)利用生物信息学分析获得NPHP4蛋白中适合作为抗原片段的氨基酸序列,选定NPHP4位于859-1058aa的cDNA片段作为免疫抗原多肽,按照大肠杆菌的密码子偏好性,进行全基因合成;所述NPHP4位于859-1058aa的cDNA片段如序列表SEQIDNO.2所示,对应的氨基酸序列如序列表SEQIDNO.3所示; (2)利用步骤(1)合成的NPHP4抗原cDNA片段和原核细胞重组表达载体pSUMO,构建NPHP4原核表达载体; (3)将步骤(2)中构建好的NPHP4原核表达载体转化至BL21(DE3)感受态细胞中,获得重组表达菌株; (4)以一定的条件诱导步骤(3)得到的重组表达菌株蛋白的表达,得到重组表达标签NPHP4抗原多肽; (5)将步骤(4)诱导表达的NPHP4抗原多肽作为抗原进行兔免疫处理,通过采血获得NPHP4蛋白兔多克隆抗血清,将抗血清亲和纯化,获得NPHP4蛋白的兔多克隆抗体。
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