南方科技大学崔欢欢获国家专利权
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龙图腾网获悉南方科技大学申请的专利一种3’mRNA测序文库的构建方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116103368B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-15发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210914546.2,技术领域涉及:C12Q1/6806;该发明授权一种3’mRNA测序文库的构建方法是由崔欢欢;陈炜;甘迪文设计研发完成,并于2022-07-29向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种3’mRNA测序文库的构建方法在说明书摘要公布了:本发明提供一种3’mRNA测序文库的构建方法,包括以下步骤:提供目标RNA;构建逆转录体系,对所述目标RNA进行逆转录,得到mRNA‑cDNA杂合链;往经过所述逆转录的所述逆转录体系中,加入转座酶,转座反应后,得到多个接头mRNA‑cDNA杂合链片段;将多个所述接头mRNA‑cDNA杂合链中的RNA降解,得到多个cDNA链;采用扩增引物对多个所述cDNA链进行扩增后,得到所述3’mRNA测序文库。在本发明中,通过采用转座酶将杂合链快速碎片化并连接接头,用以后续标记序列的连接,操作便捷快速;同时,将转座酶与逆转录反应体系混合反应,利用没有失活的逆转录酶将碎片化的杂合链补平,省略了传统的补平步骤,以此在保证富集程度的同时进一步提高建库效率。
本发明授权一种3’mRNA测序文库的构建方法在权利要求书中公布了:1.一种3’mRNA测序文库的构建方法,其特征在于,所述3’mRNA测序文库的构建方法包括以下步骤: 提供目标RNA; 构建逆转录体系,对所述目标RNA进行逆转录,得到mRNA-cDNA杂合链,其中,所述逆转录体系包括逆转录酶和逆转录引物,所述逆转录引物包括接头1和逆转录序列; 往经过所述逆转录的所述逆转录体系中,加入转座酶,转座反应后,得到多个接头mRNA-cDNA杂合链片段,其中,所述转座酶具有接头2; 将多个所述接头mRNA-cDNA杂合链片段中的RNA降解,得到多个cDNA链; 采用扩增引物对多个所述cDNA链进行扩增后,得到所述3’mRNA测序文库,其中,所述扩增引物包括标记引物2和标记引物1,所述标记引物1包括依次连接的扩增序列1、标记序列1及接头1’,所述标记引物2包括依次连接的扩增序列2、标记序列2及接头2’,所述接头1’可与所述接头1形成双链,所述接头2’可与所述接头2形成双链,且所述标记序列1与所述标记序列2不同;所述扩增引物还包括扩增短引物1和扩增短引物2,所述扩增短引物1的序列与所述扩增序列1相同,所述扩增短引物2的序列与所述扩增序列2相同。
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