山西尚宁高科技医学检验中心(有限公司)王振玲获国家专利权
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龙图腾网获悉山西尚宁高科技医学检验中心(有限公司)申请的专利一种HPV特异性miR-34、miR-199和miR-199的四重荧光检测试剂盒获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115976201B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-18发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210815612.0,技术领域涉及:C12Q1/6886;该发明授权一种HPV特异性miR-34、miR-199和miR-199的四重荧光检测试剂盒是由王振玲;任鑫鑫;赵锡鑫;张颖婕设计研发完成,并于2022-07-09向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种HPV特异性miR-34、miR-199和miR-199的四重荧光检测试剂盒在说明书摘要公布了:本申请涉及一种HPV特异性miR‑34、miR‑199和miR‑199的四重荧光检测试剂盒,其包括miR‑34、miR‑199和miR‑199所对应的逆转录引物、探针和上游和下游引物。本申请中三种人乳头瘤病毒特异性microRNA逆转录使用的是发夹茎环法,其产物为一种稳定的发夹结构,特异性结合小分子microRNA,排除长链RNA干扰,因而其特异性更强,成本较低,同时为四重荧光定量PCR提供了可能。本申请中的四重荧光定量PCR在同一个反应管中同时加入miR‑34,miR‑145、miR‑199和内参的四套引物和四种荧光的探针,同时进行荧光定量PCR互不干扰,在保证检测灵敏度的条件下,提升了检测效率。本申请中提供的miR‑34,miR‑145、miR‑199定量参考品,能够绘制标准曲线并且定量标本中的拷贝数浓度,比目前的相对定量方法准确度更高。
本发明授权一种HPV特异性miR-34、miR-199和miR-199的四重荧光检测试剂盒在权利要求书中公布了:1.一种HPV特异性miR-34、miR-145和miR-199的四重荧光检测试剂盒,其特征在于,包括以下引物和探针: miR-34茎环法逆转录引物如序列1所示,具体为:TACGCTACATTGACGCCATTCGATGCATTAACGCCGGATCAGCTAGCGATTGAC, 检测miR-34的荧光探针如序列2所示,具体为:CGATCATCGGTAGCTCGATCGAGC, 检测miR-34的上游引物如序列3所示,具体为:CAGTTAGCCTAGACTGCATC, 检测miR-34的下游引物如序列4所示,具体为:TCGATGCCAATCGTTACG; miR-145茎环法逆转录引物如序列5所示,具体为:TCGATTGCCTAGCTGCAGTCGAAATGCTTCGGACGAACGTACGATCTGTGCAT, 检测miR-145的荧光探针如序列6所示,具体为:GTATAGAATTGCCATTGTACTCAG, 检测miR-145上游引物如序列7所示,具体为:GCTTACTAATCAGTATGTG, 检测miR-145下游引物如序列8所示,具体为:CTACGTAACCGTACGT; miR-199茎环法逆转录引物如序列9所示,具体为:TAGCTTGAACTGGCCAATGGATGCATTCCAGGTGCTAAGGTACTGAC, 检测miR-199的荧光探针如序列10所示,具体为:CTGATTCCAGTCAAGTCAATGAGTC, 检测miR-199上游引物如序列11所示,具体为:TGCAATCCGATTCGTCATG, 检测miR-199下游引物如序列12所示,具体为:GTCAAGTTCCGATCGGC; 所述的试剂盒还包括有内参的引物和探针, 内参的茎环法逆转录引物如序列13所示,具体为:ATCCATGGCTTAGCAGGTAGCTAGTCGAATGCTAGTCAGTCGATGTAAGC, 检测内参的荧光探针如序列14所示,具体为:TGCATCGATACATGTACTAGTAATG, 内参的上游引物如序列15所示,具体为:GTCTACTTAGTATCGTCT, 内参的下游引物如序列16所示,具体为:CAGTTCGATCAGTAAG。
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