南昌大学第一附属医院陈硕获国家专利权
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龙图腾网获悉南昌大学第一附属医院申请的专利单细胞测序高效捕获中性粒细胞的外周血裂红方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120098920B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-22发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510602291.X,技术领域涉及:C12N5/0787;该发明授权单细胞测序高效捕获中性粒细胞的外周血裂红方法是由陈硕;曹春水;田妍;徐建青设计研发完成,并于2025-05-12向国家知识产权局提交的专利申请。
本单细胞测序高效捕获中性粒细胞的外周血裂红方法在说明书摘要公布了:本发明涉及生物医药技术领域,提供单细胞测序高效捕获中性粒细胞的外周血裂红方法。包括以下步骤:收集人外周血至含有乙二胺四乙酸抗凝管中;取乙二胺四乙酸抗凝全血,加入红细胞裂解液,室温裂解,待浑浊的混合血溶液变成澄清透明,等待1分钟后,加入FACS细胞重悬液终止裂红,离心;加入FACS细胞重悬液缓慢重悬细胞,离心;加入FACS细胞重悬液缓慢重悬细胞,离心;加入磷酸缓冲液缓慢重悬细胞,离心。本发明通过选用合适的抗凝剂、精准控制红细胞裂解条件及细致的细胞重悬与离心操作,可以保证中性粒细胞高活性和低细胞碎片率,为单细胞RNA测序提供合适的单细胞悬液,有助于解析中性粒细胞各种亚群的特性及功能。
本发明授权单细胞测序高效捕获中性粒细胞的外周血裂红方法在权利要求书中公布了:1.单细胞测序高效捕获中性粒细胞的外周血裂红方法,其特征在于:包括以下步骤: 步骤S1:收集0.5-1mL人外周血至含有乙二胺四乙酸抗凝管中,轻摇混匀,得到乙二胺四乙酸抗凝全血; 步骤S2:取乙二胺四乙酸抗凝全血至离心管中,加入6-7倍体积的红细胞裂解液,轻摇混匀后,室温裂解,待浑浊的混合血溶液变成澄清透明,等待1分钟后,加入3-4mL的FACS细胞重悬液终止裂红,离心,离心的条件是300g,3分钟,10℃; 步骤S3:弃上清,加入4-5mL的FACS细胞重悬液缓慢重悬细胞,离心,离心的条件是250g,3分钟,10℃; 步骤S4:弃上清,加入4-5mL的FACS细胞重悬液缓慢重悬细胞,离心,离心的条件是200g,3分钟,10℃; 步骤S5:弃上清,加入4-5mL磷酸缓冲液缓慢重悬细胞,离心,离心的条件是200g,3分钟,10℃; 其中,FACS细胞重悬液由19.6mL的1倍浓度磷酸缓冲液和400μl胎牛血清配置,现配现用; 步骤S2-步骤S5的离心过程中,离心机升降速的角加速度≤5.3rads2。
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