西南大学吴荣华获国家专利权
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龙图腾网获悉西南大学申请的专利一种维氏气单胞菌突变株的制备方法及应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118308281B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-25发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202410565702.8，技术领域涉及：C12N1/21；该发明授权一种维氏气单胞菌突变株的制备方法及应用是由吴荣华;庞旭;李云;叶华;韦金明设计研发完成，并于2024-05-09向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种维氏气单胞菌突变株的制备方法及应用在说明书摘要公布了：本发明公开了一种维氏气单胞菌突变株的制备方法及应用，属于微生物技术领域，所述制备方法包括以下步骤，S1、提取维氏气单胞菌全基因组；S2、构建cheZmshKaerA基因敲除所使用的引物；S3、以所提取的维氏气单胞菌全基因组为模板，使用引物进行目的基因上下游同源臂扩增和重叠延伸，得到缺失后的cheZmshKaerA基因片段；S4、缺失后的cheZmshKaerA基因片段导入自杀质粒pRE112，得到重组质粒pRE112‑ΔCMA；S5、将重组质粒pRE112‑ΔCMA转入WM3064感受态细胞，通过接合转移构建同源重组突变株，再通过蔗糖压力筛选，得到所述维氏气单胞菌突变株ΔCMA。本发明通过分子克隆技术、OverlapPCR技术和同源重组技术，利用自杀载体对维氏气单胞菌cheZmshKaerA基因进行框内缺失突变，获得三基因缺失的且能稳定遗传的维氏气单胞菌突变菌ΔCM。
本发明授权一种维氏气单胞菌突变株的制备方法及应用在权利要求书中公布了：1.一种维氏气单胞菌突变株的制备方法，其特征在于：包括以下步骤， S1、提取维氏气单胞菌全基因组，构建cheZmshKaerA基因敲除所使用的引物； S2、以所提取的维氏气单胞菌全基因组为模板，使用引物进行目的基因上下游同源臂扩增和重叠延伸，得到缺失后的cheZmshKaerA基因片段； S3、缺失后的cheZmshKaerA基因片段导入自杀质粒pRE112，得到重组质粒pRE112-ΔCMA； S4、将重组质粒pRE112-ΔCMA转入WM3064感受态细胞，通过接合转移构建同源重组突变株，再通过蔗糖压力筛选，得到cheZmshKaerA三个基因被敲除的维氏气单胞菌突变株ΔCMA。
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