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龙图腾网获悉中国科学技术大学申请的专利一种类免疫SERS夹心法检测NDKA蛋白的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115931827B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-25发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310046818.6，技术领域涉及：G01N21/65；该发明授权一种类免疫SERS夹心法检测NDKA蛋白的方法是由徐维平;甘恬设计研发完成，并于2023-01-31向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种类免疫SERS夹心法检测NDKA蛋白的方法在说明书摘要公布了：本发明提供了一种类免疫SERS夹心法检测NDKA蛋白的方法，该方法为：将柠檬酸三钠水溶液加入至水中，然后加入HAuCl4水溶液和AgNO3水溶液，孵育后在100℃下搅拌回流，得到含Au20NPs的混合液A；将含Au20NPs的混合液A中加入三氯甲烷震荡后，加入丙酮，在液面自组装形成金膜，转移到氨基化的硅片上，然后浸泡在含有NDKA蛋白和聚多巴胺的溶液中浸泡，得到SERS活性基底；制备含Au45NPs的混合液B，加入至4‑巯基苯甲酸中离心，得到Au@4‑MBA；将NDKA抗体加入至Au@4‑MBA中，孵育、离心，沉淀物质封闭后离心，沉淀物质分散于超纯水中，得到SERS标签；先将待测NDKA蛋白溶液滴加在SERS活性基底上，再滴加SERS标签，进行拉曼光谱仪检测。本发明能特异性地检测出NDKA蛋，灵敏度高、操作简单。

本发明授权一种类免疫SERS夹心法检测NDKA蛋白的方法在权利要求书中公布了：1.一种类免疫SERS夹心法检测NDKA蛋白的方法，其特征在于，该方法为： S1、将质量分数为1％的柠檬酸三钠水溶液加入至水中，然后加入质量分数为1％的HAuCl4水溶液和质量分数为0.1％的AgNO3水溶液，孵育4min～5min后，得到混合液A，将所述混合液A在温度为100℃的水浴条件下搅拌回流30min～35min，得到含金纳米颗粒的混合液A；所述含金纳米颗粒的混合液A中金纳米颗粒的平均粒径为20nm，所述含金纳米颗粒的混合液中金纳米颗粒记为Au20NPs；所述质量分数为1％的柠檬酸三钠水溶液、水、质量分数为1％的HAuCl4水溶液和质量分数为0.1％的AgNO3水溶液的体积比为：0.9：0.85：0.75：0.0425； S2、向S1中得到的含金纳米颗粒的混合液A中加入三氯甲烷，震荡后，沿着管壁加入丙酮，在液面进行自组装形成金膜，将所述金膜转移到氨基化的硅片上，得到附载有Au20NPs的硅片； S3、将S2中得到的附载有Au20NPs的硅片浸泡在含有NDKA蛋白和聚多巴胺的溶液中，浸泡4h～5h，取出后自然晾干，得到SERS活性基底； S4、将质量分数为1％的柠檬酸三钠水溶液加入至水中，然后加入质量分数为1％的HAuCl4水溶液和质量分数为0.1％的AgNO3水溶液，孵育5min～6min后，得到混合液B，将所述混合液B在温度为100℃的水浴条件下搅拌回流30min～35min，得到含金纳米颗粒的混合液B；所述含金纳米颗粒的混合液B中金纳米颗粒的平均粒径为45nm，所述含金纳米颗粒的混合液中金纳米颗粒记为Au45NPs；所述质量分数为1％的柠檬酸三钠水溶液、水、质量分数为1％的HAuCl4水溶液和质量分数为0.1％的AgNO3水溶液的体积比为：0.5：0.5：0.5：0.0425； S5、将S4中得到的含金纳米颗粒的混合液B加入至4-巯基苯甲酸中，在室温的条件下搅拌均匀后、离心后，将沉淀物质超声分散到水中，得到的物质命名为Au@4-MBA； S6、将NDKA抗体加入至S5中得到的Au@4-MBA中，在温度为4℃的条件下孵育5h～6h后离心，将沉淀物质用5％牛血清白蛋白溶液封闭，然后再离心，将沉淀物质分散于超纯水中，得到SERS标签； S7、先将待测NDKA蛋白溶液滴加在S3中得到的SERS活性基底上，然后再滴加S6中得到的SERS标签，进行拉曼光谱仪检测，根据拉曼报告分子的信号强度，定性和半定量的检测待测NDKA蛋白溶液中NDKA蛋白的种类和含量。

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