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龙图腾网获悉浙江大学申请的专利湖羊瘤胃上皮类器官培养基、上皮类器官的体外构建方法及应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116042510B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-25发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310047856.3，技术领域涉及：C12N5/071；该发明授权湖羊瘤胃上皮类器官培养基、上皮类器官的体外构建方法及应用是由王佳堃;徐泽邦;杨斌;黄开朗;曾洪波设计研发完成，并于2023-01-31向国家知识产权局提交的专利申请。

本湖羊瘤胃上皮类器官培养基、上皮类器官的体外构建方法及应用在说明书摘要公布了：本发明涉及一种湖羊瘤胃上皮类器官培养基、上皮类器官的体外构建方法及应用。一种湖羊瘤胃上皮类器官培养基，包括：AdvancedDMEMF‑12基础培养基、N‑2添加剂、B‑27添加剂、GlutaMax、青霉素、链霉素、HEPES、烟酰胺、N‑乙酰‑L‑半胱氨酸、表皮生长因子、Wnt3a蛋白、R‑spondin1蛋白、Noggin蛋白、胰岛素样生长因子1、成纤维细胞生长因子10、CHIR99021、A8301、SB202190、Y27632。该培养基可实现从原代湖羊瘤胃上皮细胞诱导构建出湖羊瘤胃上皮类器官，类器官形成率可达15％以上，培养形成的类器官具有与组织相似的复层结构。

本发明授权湖羊瘤胃上皮类器官培养基、上皮类器官的体外构建方法及应用在权利要求书中公布了：1.一种湖羊瘤胃上皮类器官的体外构建方法，其特征在于该方法包括以下步骤： （1）采样：取湖羊瘤胃，用含4抗的PBS冲洗并剥离肌肉层，在含4抗的DMEM中储存；所述4抗是青霉素、链霉素、庆大霉素和两性霉素B四种抗生素； （2）瘤胃上皮细胞分离：将上皮组织分成小块，用含4抗的PBS多次清洗，清洗后的上皮组织小块加入胰蛋白酶-EDTA消化液在37℃水浴振荡消化，等到圆形的上皮细胞被消化下来后终止消化并收集细胞； （3）瘤胃上皮细胞培养：分离的细胞悬浮在湖羊瘤胃上皮细胞培养基中后在CO2恒温培养箱中培养，瘤胃上皮细胞可传代、冻存； （4）瘤胃类器官构建：将细胞从培养皿中消化下来并悬浮在基质胶中后接种在24孔板上，加入湖羊瘤胃上皮类器官培养基，在CO2恒温培养箱中培养，2～3天换液，培养9天后得到湖羊瘤胃上皮类器官； 其中，所述湖羊瘤胃上皮细胞培养基包括：DMEM、胎牛血清、青霉素、链霉素、胰岛素、表皮生长因子EGF和Y-27632； 所述湖羊瘤胃上皮类器官培养基包括：AdvancedDMEMF-12基础培养基、N-2添加剂、B-27添加剂、GlutaMax、青霉素、链霉素、HEPES、烟酰胺、N-乙酰-L-半胱氨酸、表皮生长因子（EGF）、Wnt3a蛋白、R-spondin1蛋白、Noggin蛋白、胰岛素样生长因子1IGF-1、成纤维细胞生长因子10FGF10、CHIR99021、A8301、SB202190、Y27632。

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