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龙图腾网获悉浙江省海洋水产研究所申请的专利一种鱼类体内肠道细胞迁移的快速标记方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114878815B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-25发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210539275.7，技术领域涉及：G01N33/569；该发明授权一种鱼类体内肠道细胞迁移的快速标记方法是由王立改;徐冬冬;陈睿毅;谭朋;竺奇慧;胡伟华;杨阳设计研发完成，并于2022-05-17向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种鱼类体内肠道细胞迁移的快速标记方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种鱼类活体标记方法，将5‑溴‑2‑脱氧尿嘧啶核苷溶液按照所需的注射剂量注射到鱼体腹部后，再将荧光探针FITC‑Keratin注射到鱼体腹部，接着将活体鱼的肠道支持制成冰冻切片后，经抗原修复、画圈封闭、加一抗、加二抗、自发荧光淬灭、DAPI复染细胞核后镜检拍照采集图像。本发明安全、高效且精准，创造性地将BrdU活体标记方法与荧光探针技术结合应用到鱼类肠道上皮细胞增殖和迁移研究中，为研究外源物质对鱼类肠道上皮细胞增殖和迁移的促进作用提供技术途径，对于鱼类的高效健康养殖具有非常重要的意义。

本发明授权一种鱼类体内肠道细胞迁移的快速标记方法在权利要求书中公布了：1.一种鱼类体内肠道细胞迁移的快速标记方法，其特征在于，包括以下步骤： （1）获取于摄食外源物质八周后鱼体腹部先后注射5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷溶液、荧光探针FITC-Keratin的活体鱼的肠道组织，并将肠道组织置于组织固定液中固定，得固定样品； 其中，于注射后的24h取所述肠道组织； 所述5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷溶液按照50mgkg的注射剂量注射； 所述荧光探针FITC-Keratin按照50mgkg的注射剂量注射，荧光探针FITC-Keratin的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示； 所述外源物质为姜黄素和或小檗碱； （2）将固定样品制成冰冻切片； （3）将冰冻切片进行抗原修复； （4）画圈封闭：将步骤（3）中得到的切片甩干后，用组化笔在组织周围的载玻片上画圈，并在圈内滴加封闭液室温孵育30min； （5）加一抗：甩掉封闭液，在切片上滴加一抗后平放于湿盒内4℃孵育过夜； （6）加二抗：将载玻片置于PBS缓冲液中，在脱色摇床上晃动洗涤后，将切片甩干后，在圈内滴加与一抗相应种属的二抗覆盖组织，避光室温孵育； （7）自发荧光淬灭：将载玻片置于PBS缓冲液中，在脱色摇床上晃动洗涤后，在圈内加入自发荧光淬灭剂，淬灭后流水冲洗； （8）DAPI复染细胞核：将载玻片置于PBS缓冲液中，在脱色摇床上晃动洗涤后，将切片甩干后用抗荧光淬灭封片剂封片； （9）镜检拍照：将切片置于荧光显微镜下观察，并采集图像。

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