默普生物科技(山东)有限公司崔运芹获国家专利权
买专利卖专利找龙图腾,真高效! 查专利查商标用IPTOP,全免费!专利年费监控用IP管家,真方便!
龙图腾网获悉默普生物科技(山东)有限公司申请的专利基因组DNA和游离DNA共提取的前处理液及提取方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119372288B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-29发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411958252.5,技术领域涉及:C12Q1/6806;该发明授权基因组DNA和游离DNA共提取的前处理液及提取方法是由崔运芹;李雪;黄洪霞;徐娜;杜洋设计研发完成,并于2024-12-30向国家知识产权局提交的专利申请。
本基因组DNA和游离DNA共提取的前处理液及提取方法在说明书摘要公布了:本发明涉及生物医学技术领域,具体涉及基因组DNA和游离DNA共提取的前处理液及提取方法,所述前处理液中包括:多羟基醇、螯合剂、防腐剂、pH缓冲液和水;所述多羟基醇包括高分子量多羟基醇和低分子量多羟基醇;所述高分子量多羟基醇选自高分子量聚乙二醇中的至少一种,高分子量聚乙二醇的分子量为1500‑40000;低分子量多羟基醇选自低分子量聚乙二醇、甘油中的至少一种,所述低分子量聚乙二醇的分子量为1000以下。在样本中加入前处理液,离心得到样本沉淀和样本上清液;样本沉淀用于基因组DNA的提取,样本上清液用于游离DNA的提取。所述提取方法可以同时实现基因组DNA和游离DNA的高纯度提取。
本发明授权基因组DNA和游离DNA共提取的前处理液及提取方法在权利要求书中公布了:1.一种基因组DNA和游离DNA共提取方法,其特征在于,所述提取方法为: 在样本中加入前处理液,然后进行离心得到样本沉淀和样本上清液;所述样本沉淀用于基因组DNA的提取,所述样本上清液用于游离DNA的提取;所述样本为尿液或血液; 所述基因组DNA的提取过程为: (1)裂解:在样本沉淀中加入裂解液和蛋白酶进行孵育; (2)结合:加入结合液,枪头吹打混匀后加入DNA结合柱中,离心弃下液; (3)漂洗:加入漂洗液I,离心弃下液;再加入漂洗液II,离心弃下液; (4)洗脱:将结合柱放入离心管中,结合柱中加入洗脱液,离心后,收集离心后的洗脱液即为基因组DNA; 所述游离DNA的提取过程为: (1)结合:样本上清液中加入硅羟基纳米磁珠的水相悬浮液或二氧化硅的水相悬浮液,上下颠倒混合后,离心弃上清液;所述二氧化硅的水相悬浮液中,二氧化硅的粒径为50-400nm; (2)漂洗:在沉淀中加入漂洗液I,转移到DNA结合柱中,离心去下液;再加入漂洗液II,离心弃下液; (3)洗脱:将结合柱放入离心管中,结合柱中加入洗脱液,离心后,收集离心后的洗脱液即为游离DNA; 所述裂解液为胍盐裂解液或SDS裂解液; 所述胍盐裂解液包括胍盐、TritonX-100、Tris-HCl、Tween-20、EDTA盐和水;所述胍盐裂解液的pH为8-9; 所述SDS裂解液包括SDS、磷酸盐、Tris-HCl、EDTA盐和水;所述SDS裂解液的pH为6-7; 所述胍盐裂解液中,胍盐在胍盐裂解液中的浓度为2M-8M;TritonX-100在胍盐裂解液中的质量浓度为0.3%-3%;Tween-20在胍盐裂解液中的质量浓度为3%-10%;EDTA盐在胍盐裂解液中的浓度为10mM-50mM;Tris-HCl在胍盐裂解液中的浓度为20mM-50mM; 所述SDS裂解液中,所述磷酸盐为磷酸钠,所述磷酸钠在SDS裂解液中的浓度为0.1M-0.5M;SDS在SDS裂解液中质量浓度为0.5%-2%;EDTA盐在SDS裂解液中的浓度为10mM-50Mm;Tris-HCl在SDS裂解液中的浓度为20mM-50mM; 所述结合液中包括胍盐、异丙醇和水;所述胍盐在所述结合液中的浓度为4M-8M;所述异丙醇在所述结合液中的质量浓度为60%-70%; 所述漂洗液I为胍盐的水溶液,或者所述漂洗液I包括胍盐、乙醇和水;所述胍盐在所述漂洗液I中的浓度为4M-5M;所述乙醇在所述漂洗液I中的质量浓度为40%-80%; 所述胍盐为盐酸胍或异硫氰酸胍; 所述漂洗液II包括Tris-HCl、Tris、乙醇和水;Tris-HCl在所述漂洗液II中的浓度为30-60mM,Tris在所述漂洗液II中的浓度为0.5M-1M,乙醇在所述漂洗液II中的质量浓度为70%-90%;所述漂洗液II的pH值为7-8; 所述前处理液由以下成分组成:多羟基醇、螯合剂、防腐剂、pH缓冲液和水;所述前处理液的pH为7-9; 所述多羟基醇为高分子量多羟基醇和低分子量多羟基醇; 所述高分子量多羟基醇选自高分子量聚乙二醇中的至少一种,所述高分子量聚乙二醇的数均分子量为1500-40000; 所述低分子量多羟基醇选自低分子量聚乙二醇中的至少一种,所述低分子量聚乙二醇的数均分子量为1000以下; 所述螯合剂为EDTA-2Na、EDTA-3K、EDTA-2K中的至少一种; 所述前处理液中,所述高分子量多羟基醇的质量占比为1%-10%;所述低分子量多羟基醇的质量占比为10%-65%;所述防腐剂的质量占比为0.5%-5%;所述螯合剂在所述前处理液中的浓度为10gL-50gL。
如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人默普生物科技(山东)有限公司,其通讯地址为:264006 山东省烟台市开发区绍兴路7号内21号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息,力求客观、公正,但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解,仅供参考使用,不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。