复旦大学附属妇产科医院张晨获国家专利权
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龙图腾网获悉复旦大学附属妇产科医院申请的专利一种精子损伤修复模型及其建立方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119530137B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-05发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411762398.2,技术领域涉及:C12N5/076;该发明授权一种精子损伤修复模型及其建立方法是由张晨;任静朝;刘婷婷;孙宽;林仙华;黄荷凤设计研发完成,并于2024-12-03向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种精子损伤修复模型及其建立方法在说明书摘要公布了:本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种精子损伤修复模型及其建立方法。包括以下步骤,步骤一、建立精子铅中毒模型;步骤二、建立铅中毒精子修复模型。所述步骤二中建立铅中毒精子修复模型,包括以下步骤:步骤1制备细胞外囊泡途径优化精子功能的制剂;步骤2细胞外囊泡途径优化精子功能的制剂对损伤精子进行修复;步骤3检测修复后的精子的活性。本发明中,通过建立精子损伤修复模型,采用细胞外囊泡改造技术,将关键功能蛋白导入胞外囊泡中,对实现改善精子损伤、体外提高弱精症患者精子运动能力的相关药物开发研究等的辅助研究具有重要意义。
本发明授权一种精子损伤修复模型及其建立方法在权利要求书中公布了:1.一种精子损伤修复模型的建立方法,其特征在于,包括以下步骤: 步骤一、建立精子铅中毒模型; 步骤二、建立铅中毒精子修复模型; 所述建立铅中毒精子修复模型,包括以下步骤: 步骤(1)制备细胞外囊泡途径优化精子功能的制剂; 步骤(2)细胞外囊泡途径优化精子功能的制剂对损伤精子进行修复; 步骤(3)检测修复后的精子的活性; 其中,所述细胞外囊泡途径优化精子功能的制剂,包括以下步骤制备而成: 步骤(1)构建质粒; 从小鼠cDNA的PCR反应扩增小鼠SKAP2-CDS序列; 将小鼠SKAP2-CDS序列插入到BamHI和EcoRI位点之间的PHY-GFP质粒中,得到重组质粒; 步骤(2)细胞转染和构建细胞系; 先使用EZ反式转染试剂进行重组质粒转染,再使用重组质粒产物对HEK293T细胞进行转染,转染完成后,离心,收集上清液; 使用收集到的上清液和等体积的新鲜培养基培养HEK293T细胞,培养完成后,将HEK293T细胞转移至在含有1μgmL嘌呤霉素的培养基中继续培养,继续培养后,将HEK293T细胞转移至在含有0.5μgmL嘌呤霉素的培养基中进行后续培养,得到细胞系; 步骤(3)分离外泌体; 将细胞系扩增培养,扩增培养完成后,洗涤,再用无血清培养基继续培养,培养完成后,收集上清液;对上清液进行离心处理,过滤,浓缩,向浓缩液中加入PBS,再次浓缩,得到外泌体悬浮液; 所述外泌体悬浮液即为细胞外囊泡途径优化精子功能的制剂。
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