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扬州大学王益平获国家专利权

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龙图腾网获悉扬州大学申请的专利一种高效筛选鉴定基因编辑植物突变体的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118421766B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-05发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202410469367.1,技术领域涉及:C12N15/11;该发明授权一种高效筛选鉴定基因编辑植物突变体的方法是由王益平;马俊;王琼;刘景澜;陈林设计研发完成,并于2024-04-18向国家知识产权局提交的专利申请。

一种高效筛选鉴定基因编辑植物突变体的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种高效筛选鉴定基因编辑植物突变体的方法。本发明公布了利用一种限制性内切酶BslI,结合CAPS和dCAPS标记技术的一种简单经济快速高效的植物基因编辑突变体筛选鉴定方法,经验证该方法具有良好的检测准确性。本发明可以广泛应用于基因编辑动植物以及微生物的筛选鉴定,具有广泛的实用性和市场推广价值。

本发明授权一种高效筛选鉴定基因编辑植物突变体的方法在权利要求书中公布了:1.一种高效筛选鉴定基因编辑植物突变体的方法,其特征在于:包括, 在PAM位点上下游分别设计一条特异性正向引物和反向引物; 利用CTAB法提取野生型和转基因植株基因组DNA; 以提取的野生型植株和转基因植株基因组DNA为模板,利用正向引物F和反向引物R和Taq聚合酶进行PCR扩增; 将PCR产物与BslI内切酶混合,进行酶切反应;所述BslI内切酶用量为0.05μl; 电泳后,将酶切产物条带与野生型植株PCR产物条带进行对比; 其中,设计引物的方法为下述任意一种: 1CRISPR-Cas9载体中的sgRNA靶标序列和PAM序列N1N2N3N4N5N6N7 N8N9N10N11N12N13N14N15N16N17N18N19N20N21G22G23中,N13=C,且N14=C,在PAM位点上下游分别设计一条正向引物和反向引物,并确保PCR产物中不包含除N13-G23位点之外的其他BslI酶切位点,长度为100-1000bp,野生型可被BslI酶切出一条经电泳后明显与未酶切的PCR产物大小有差异的条带; 2CRISPR-Cas9载体中的sgRNA靶标序列和PAM序列N1N2N3N4N5N6N7N8N9N10N11N12N13N14N1 5N16N17N18N19N20N21G22G23中,不同时满足N13=C,N14=C,则设计正向引物长度为25-35nt,位于PAM上游,使sgRNA靶标序列相应位置N13N14为非CC的碱基情况下突变为CC,反向引物为PAM下游100-200bp内的一条反向互补序列,并确保PCR产物中不包含除CCN15N16N17N18N19N20N21G22G23位点之外含有BslI酶切位点。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人扬州大学,其通讯地址为:225009 江苏省扬州市大学南路88号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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