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广西医科大学第一附属医院李浪获国家专利权

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龙图腾网获悉广西医科大学第一附属医院申请的专利蛋白偶联微球制备方法及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118340932B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-05发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202410222464.0,技术领域涉及:A61L24/04;该发明授权蛋白偶联微球制备方法及其应用是由李浪;孙羽涵;周游;易泽强;王现涛;刘涛;杨帆设计研发完成,并于2024-02-28向国家知识产权局提交的专利申请。

蛋白偶联微球制备方法及其应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种蛋白偶联微球制备方法及其应用,其以羧基聚苯乙烯微球为载体,采用化学法将纤维蛋白原共价偶联于所述羧基聚苯乙烯微球表面制备蛋白偶联微球,还将制备得到的蛋白偶联微球在构建冠状动脉微栓塞动物模型中作为栓塞剂应用。本发明制备的蛋白偶联微球经电镜证实新模型微循环物理梗阻的同时,蛋白偶联微球表面纤维蛋白原被激活变成纤维蛋白,聚集血小板,形成微血栓,更接近真实疾病状态,解决现有技术栓塞剂不能发挥促微血栓形成的生物学功能,无法复现微栓塞的生物学损伤机制的技术问题。

本发明授权蛋白偶联微球制备方法及其应用在权利要求书中公布了:1.蛋白偶联微球制备方法,其特征在于,以粒径为45μm的羧基聚苯乙烯微球为载体,羧基聚苯乙烯微球个数与纤维蛋白原重量比为4×104个:200-600μg,采用化学法将纤维蛋白原共价偶联于所述羧基聚苯乙烯微球表面,包括步骤如下: 1)将羧基聚苯乙烯微球离心后吸弃上清液; 2)加入偶联缓冲液重悬清洗微球,离心吸除上清液,重复1-3次; 3)向微球沉淀中加入偶联缓冲液、EDC溶液和Sulfo-NHS溶液,混匀,室温混匀孵育10-20分钟后,离心并吸弃上清;其中,所述EDC溶液为以偶联缓冲液配置成50mgmL浓度的溶液,所述Sulfo-NHS溶液为以偶联缓冲液配置成50mgmL浓度的溶液,加入的偶联缓冲液:EDC溶液:Sulfo-NHS溶液的体积比为60:20:20; 4)用偶联缓冲液清洗微球,涡旋混匀,离心并吸弃上清液,得到待偶联的羧基聚苯乙烯微球; 5)将纤维蛋白原加入37℃的0.9%氯化钠溶液中配置成纤维蛋白原溶液,其中,纤维蛋白原与氯化钠溶液的重量体积比为5mg:1mL; 6)向待偶联的羧基聚苯乙烯微球中加入偶联缓冲液和纤维蛋白原溶液,涡旋混匀,室温下持续震荡孵育50-70分钟;其中,偶联缓冲液与纤维蛋白原溶液的体积比为100:40-120; 7)离心并吸取上清残余蛋白液,用于后续质控; 8)向步骤7)的微球沉淀加入淬灭缓冲液,涡旋混匀,离心并吸弃上清液; 9)向步骤8)的微球沉淀加入淬灭缓冲液,室温孵育60-70分钟,离心并吸弃上清液; 10)向步骤9)的微球沉淀加入淬灭缓冲液,涡旋混匀,离心并吸弃上清液,留沉淀得蛋白偶联微球; 11)将步骤10)的微球沉淀添加储存缓冲液,涡旋混合并在2-8℃储存,得到预制的蛋白偶联微球存储液。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人广西医科大学第一附属医院,其通讯地址为:530021 广西壮族自治区南宁市双拥路6号广西医科大学第一附属医院;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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