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龙图腾网获悉云南省微生物发酵工程研究中心有限公司申请的专利一种烟草根结线虫的室内培养方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115885937B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-05发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211621119.1，技术领域涉及：A01K67/30；该发明授权一种烟草根结线虫的室内培养方法是由毛明林;杨润霞;李诚;叶敏;赵崇钧;潘菲;尚海丽设计研发完成，并于2022-12-16向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种烟草根结线虫的室内培养方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种烟草根结线虫的室内培养方法，涉及烟草根结线虫培养技术领域，解决了现有技术中烟草根结线虫的繁殖与培养依赖于活体寄主植物、需要温室、土壤及易感植物品种，涉及实验材料多、操作繁琐、周期长、不易管理的技术问题。本发明烟草根结线虫的室内培养方法，包括如下步骤：禾谷镰刀菌的分离纯化及培养、禾谷镰刀菌种子液制备、用于培养烟草根结线虫的禾谷镰刀菌平板的制作、通过过筛法筛选得到烟草根结线虫虫卵和烟草根结线虫、接种并培养烟草根结线虫。本发明烟草根结线虫的室内培养方法，具有简便、快捷，能够大量获取植物烟草根结线虫的优势，能够在很大程度为室内筛选烟草根结线虫生防菌及其化学农药提供了测试对象。

本发明授权一种烟草根结线虫的室内培养方法在权利要求书中公布了：1.一种烟草根结线虫的室内培养方法，其特征在于，包括如下步骤： 步骤1：禾谷镰刀菌的分离纯化及培养，将赤霉病发病病株的秸秆利用组织分离和单孢纯化培养法得到禾谷镰刀菌纯化菌种； 步骤2：禾谷镰刀菌种子液制备，利用打孔器将步骤1所得的禾谷镰刀菌纯化菌种及其载体打孔后挑取接种至液体PDA培养基中，在温度为27℃-28℃条件下，转速为180rmin条件下培养72h，得到禾谷镰刀菌种子液，即为禾谷镰刀菌菌悬液；菌悬液的有效活菌数控制在0.50×108cfug以上； 步骤3：用于培养烟草根结线虫的禾谷镰刀菌平板的制作，将所得禾谷镰刀菌种子液吸取100-200uL至固体PSA培养基上涂布均匀，后放置于28℃恒温培养箱中培养5-7天，直至菌丝长满平板备用； 步骤4：通过过筛法筛选得到烟草根结线虫虫卵和烟草根结线虫，利用移液枪将烟草根结线虫收集到烧杯中，并用蒸馏水稀释配制成烟草根结线虫的含量为200条10mL的菌悬液； 步骤5：在无菌条件下吸取1mL所述菌悬液接种至长满禾谷镰刀菌的固体PSA平板上，左右摇晃使长满禾谷镰刀菌的固体PSA培养基完全浸透菌丝并与菌丝混匀，且使烟草根结线虫悬浮液液滴浸沉于PSA平板中； 步骤6：用封口膜将培养皿进行封口，培养皿正面朝上，培养皿在28℃恒温培养箱中，且在黑暗条件培养7-14天，用无菌水冲洗PSA平板获取烟草根结线虫悬液，收集到烟草根结线虫悬浮液。

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