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龙图腾网获悉帕兰卡有限公司申请的专利一种制备测序文库的多重方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114364812B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-05发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202080064097.6，技术领域涉及：C12Q1/6806；该发明授权一种制备测序文库的多重方法是由N·坎普贝尔设计研发完成，并于2020-09-11向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种制备测序文库的多重方法在说明书摘要公布了：描述了一种通过多重扩增制备用于靶向下一代测序的文库构建体文库的方法。该方法包括以下步骤：a提供包含i多个不同靶序列的反应容器，ii多个靶捕获引物对，和iii一个或多个加标签引物对，b在顺序退火温度下进行顺序轮次的扩增，所述温度被配置以扩增靶序列，产生包含第一和第二读段序列的靶序列，并提供以顺序方式包含衔接子连接的构建体文库的反应产物；以及；c从反应产物中捕获构建体库。正向和反向加标签引物之一在5'端包含纯化标记，并以有限的浓度提供，由此文库构建体包含大量仅包含一个索引序列和仅一个衔接子序列的部分构建体，以及有限数量的包含第一个和第二个索引序列、第一个和第二个衔接子序列和纯化标记的完全完整构建体。捕获步骤包括使用纯化标记从反应产物中捕获完全完整的构建体。

本发明授权一种制备测序文库的多重方法在权利要求书中公布了：1.一种通过多重扩增制备用于靶向下一代测序的文库构建体的方法，其包括以下步骤： a提供第一反应容器，其包含： i至少一个样品，所述样品包含多个不同靶序列； ii用于所述至少一个样品的多个靶特异性引物对，其中每个引物对包含： 正向引物，其在5'至3'方向上包含第一读段序列和靶特异性序列；以及 反向引物，其在5'至3'方向上包含第二读段序列和靶特异性序列； iii用于所述至少一个样品的加标签引物对，其包含： 正向加标签引物，其在5'至3'方向上包含第一衔接子序列，第一索引序列和第一读段序列引物位点；以及 反向加标签引物，其在5'至3'方向上包含第二衔接子序列，第二索引序列和第二读段序列引物位点， b在顺序退火温度下，在第一反应容器中进行顺序轮次的扩增，所述温度被配置以扩增靶序列，产生包含第一和第二读段序列的靶序列，并提供以顺序方式包含衔接子连接的构建体的文库的反应产物；以及 c从所述反应产物中捕获衔接子连接的构建体的文库， 其特征在于正向和反向加标签引物之一在5'端包含纯化标记，并以有限的浓度提供，由此衔接子连接的构建体的文库包含： 部分构建体，所述部分构建体含有第一索引序列和第一衔接子序列或者所述部分构建体含有第二索引序列和第二衔接子序列；以及 完整构建体，所述完整构建体含有第一和第二索引序列、第一和第二衔接子序列和纯化标记， 其中所述反应产物包含相对于完整构建体过量的部分构建体，并且其中步骤c包括仅捕获包含所述纯化标记的完整构建体。

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