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南京农业大学李钰获国家专利权

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龙图腾网获悉南京农业大学申请的专利一种Efibula sp. ET39真菌原生质体遗传转化方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120249348B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-08发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510716324.3,技术领域涉及:C12N15/80;该发明授权一种Efibula sp. ET39真菌原生质体遗传转化方法是由李钰;叶永浩;严威;姚宓池;何波设计研发完成,并于2025-05-30向国家知识产权局提交的专利申请。

一种Efibula sp. ET39真菌原生质体遗传转化方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种Efibulasp.ET39真菌原生质体遗传转化方法。本发明首次建立了Efibulasp.ET39真菌原生质体遗传转化方法,采用Driselase、LysingEnzymes和Lywallzyme配制的混合酶液,质量比为1:1:1,在0.6~0.7MMgSO4缓冲液,30℃,酶解3h的条件下能够获得较高得率的原生质体,可达2.28×107个mL;该方法具有转化效率高(6‑8个转化子μgDNA)、转化时间周期短(1‑2周)等特点,可为今后Efibulasp.ET39真菌的基因功能与活性代谢产物研究工作提供有力支撑。

本发明授权一种Efibula sp. ET39真菌原生质体遗传转化方法在权利要求书中公布了:1.一种无锁革属(Efibulasp.)ET39真菌原生质体遗传转化方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤: (1)菌丝的培养与预处理:将Efibulasp.ET39接种于培养基培养,离心去除上清,保留菌丝; (2)酶液的配制:取裂解酶Driselase、LysingEnzymes和Lywallzyme各5mg,溶解于1mL0.6~0.7MMgSO4的缓冲液中,过滤除菌备用; (3)原生质体的制备与转化:向步骤(1)预处理后的100mg菌丝加入步骤(2)的酶液,25℃~30℃,70-100rpm,酶解2-4h,酶解结束后,过滤,沉淀用STC水溶液重悬,洗涤,得到原生质体悬浮液;将所述原生质体悬浮液与含有目的基因的质粒混合,得到第一原生质体悬浮液;然后向第一原生质体溶液中加入PTC溶液,得到第二原生质体悬浮液; (4)原生质体的再生:将步骤(3)中的第二原生质体悬浮液加入再生培养基培养至再生转化子长出; 步骤(1)中的Efibulasp.ET39接种于PDB培养基培养,培养条件为:25℃~30℃,70-100rpm培养2-3d。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人南京农业大学,其通讯地址为:211225 江苏省南京市溧水区白马镇国家农业科技园南京农业大学基地;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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