中南大学湘雅医院吕红斌获国家专利权
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龙图腾网获悉中南大学湘雅医院申请的专利一种细胞外基质高保留的脱细胞半月板及其制备方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116870255B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-08发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310958635.1,技术领域涉及:A61L27/36;该发明授权一种细胞外基质高保留的脱细胞半月板及其制备方法是由吕红斌;章涛;石新;胡建中设计研发完成,并于2023-08-01向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种细胞外基质高保留的脱细胞半月板及其制备方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种细胞外基质高保留的脱细胞半月板及其制备方法。该方法包括下述步骤:1将生物材料进行冻融循环;2将步骤1中的经冻融循环处理后的生物材料取出依次经细胞洗脱液:A液、B液、C液、D液直至生物材料脱细胞结束;其中用A液、B液、C液、D液进行洗脱时,所述生物材料固定于容器内进行;其中,A液为TritonX‑100溶液;B液、D液为PBS;C液为脱氧核糖核酸酶I和核糖核酸酶A组成的核酸酶溶液;细胞洗脱液中不含有胰蛋白酶;A液洗脱时间为7天。本发明的脱细胞方法能够在完全去除细胞成分的同时,尽可能地保留半月板细胞外基质成分,为细胞生长提供原生态微环境。
本发明授权一种细胞外基质高保留的脱细胞半月板及其制备方法在权利要求书中公布了:1.一种细胞外基质高保留的脱细胞半月板制备方法,其特征在于,其包括下述步骤: 1将生物材料进行冻融循环; 在所述冻融循环之前,所述生物材料用磷酸盐缓冲液清洗; 所述冻融循环次数为3-5次,其中,单次循环的条件为:液氮冷冻4-8分钟,30-40℃水浴解冻8-15分钟; 2将步骤1中的经冻融循环处理后的生物材料取出依次经细胞洗脱液:A液、B液、C液、D液直至生物材料脱细胞结束;其中用A液、B液、C液、D液进行洗脱时,所述生物材料固定于容器内进行; 其中,所述A液为含有1%青霉素-链霉素的0.1%TritonX-100溶液;所述B液、D液为无菌1%青霉素-链霉素的PBS;所述C液为含有300UImL脱氧核糖核酸酶I和500μgmL核糖核酸酶A组成的核酸酶溶液; 所述A液洗脱的条件为在4℃下于摇床上80rpmmin连续搅拌; 所述B液洗脱的条件为在4℃下于摇床上150rpmmin搅拌洗涤3次,每次2小时; 所述C液洗脱的条件为置于37℃恒温摇床中100rpmmin孵育24小时; 所述D液洗脱的条件为利用无菌1%青霉素-链霉素的PBS冲洗3次,每次6小时; 所述细胞洗脱液中不含有胰蛋白酶; 当所述经冻融循环处理后的生物材料经A液洗脱时,洗脱时间为7天。
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