买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

龙图腾网获悉青海互助天佑德青稞酒股份有限公司;中国食品发酵工业研究院有限公司申请的专利评价酒体中不同微量成分对细胞自噬水平影响程度的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116203002B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-08发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310098248.5，技术领域涉及：G01N21/64；该发明授权评价酒体中不同微量成分对细胞自噬水平影响程度的方法是由黄和强;陈杉彬;李善文;韩兴林;王德良;冯声宝;赵文梅设计研发完成，并于2023-02-10向国家知识产权局提交的专利申请。

本评价酒体中不同微量成分对细胞自噬水平影响程度的方法在说明书摘要公布了：本申请用于食品领域，公开了一种评价酒体微量成分对细胞自噬水平影响程度的方法，包括以下步骤：步骤一、配制稳定表达GFP‑RFP‑LC3蛋白的人肝细胞LO2单细胞悬液；步骤二、将1.5×104cellmL的该LO2细胞接种于6孔板中盖玻片培养24h至贴壁；步骤三、加入2mL含80μL纯酒精或含不同酒体微量成分酒样的细胞培养，37℃,5％CO2条件培养24h。步骤四、4％多聚甲醛中固定15min。步骤五、PBS清洗玻片晾干后滴加含DAPI的防淬灭剂，爬满细胞的一面置于防淬灭剂上。步骤六、激光共聚焦显微镜观察红绿荧光，根据不同荧光判断酒体微量成分对细胞自噬的影响。本申请通过上述观察不同荧光能够快速评价酒体中微量成分对细胞自噬水平的影响程度。

本发明授权评价酒体中不同微量成分对细胞自噬水平影响程度的方法在权利要求书中公布了：1.一种评价酒体中不同微量成分对细胞自噬水平影响程度的方法，其特征在于，包括以下步骤： 步骤一、将对数生长期稳定表达GFP-RFP-LC3蛋白的人肝细胞L02用胰蛋白酶消化，配制成单细胞悬液； 步骤二、在6孔板中每个孔均匀放置3个盖玻片，在6孔板孔中先加少量培养液，使玻片紧密贴合，按1.5×104cellmL的密度将稳定表达GFP-RFP-LC3的L02细胞接种于6孔板中，每孔1mL,盖上6孔板后置于在37℃,5％CO2条件下进行培养24h至细胞贴壁； 步骤三、移去培养液，用PBS清洗2遍，之后贴壁加入2mL细胞培养混合液，其中包含80μL样品，在37℃,5％CO2条件下进行培养24h； 步骤四、移去上清液，用PBS清洗2遍，然后在4％多聚甲醛中固定15min； 步骤五、用PBS清洗2遍，用镊子将玻片夹起，将玻片置于滤纸上晾干，并在载玻片上滴加含DAPI的防淬灭剂，将爬满细胞的一面置于防淬灭剂上； 步骤六、使用激光共聚焦显微镜观察荧光； GFP-RFP-LC3蛋白的氨基酸序列为SEQIDNO.1；稳定表达GFP-RFP-LC3蛋白的人肝细胞L02的制备方法包括：克隆或合成GFP、RFP、LC3基因，组装GFP-RFP-LC3质粒；将GFP-RFP-LC3质粒与pMD2G和PSApX2包装质粒共转染至293T细胞，制备携带GFP-RFP-LC3基因的慢病毒；使用慢病毒感染肝组织细胞。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人青海互助天佑德青稞酒股份有限公司;中国食品发酵工业研究院有限公司，其通讯地址为：810500 青海省海东市互助县威远镇西大街6号；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。