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龙图腾网获悉四川大学申请的专利一种颞下颌关节盘干细胞分离培养方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116376819B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-08发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310108930.8，技术领域涉及：C12N5/0775；该发明授权一种颞下颌关节盘干细胞分离培养方法是由祝颂松;王艺儒;毕瑞野;王鹏;李昊翰;方涵;杨仙妮;李倩琍设计研发完成，并于2023-02-09向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种颞下颌关节盘干细胞分离培养方法在说明书摘要公布了：本发明属于细胞培养技术领域，本发明提供了一种颞下颌关节盘干细胞分离培养方法。本发明方法包括取样、样本处理、酶消化、获取单细胞悬液、关节盘干细胞的分选、原代细胞种板和传代培养几个步骤。本发明方法具有提取时间短、加快实验周期、适用范围广，能应用于珍稀样本或者体积微小样本等优势。本发明通过磁珠分选CD90阳性细胞来获得关节盘干细胞，并且符合间充质干细胞标准，为未来关节盘干细胞治疗提供支持。

本发明授权一种颞下颌关节盘干细胞分离培养方法在权利要求书中公布了：1.一种颞下颌关节盘干细胞分离培养方法，其特征在于，包括如下步骤： （1）取样：将颞下颌关节盘放入缓冲液中清洗后，去除附着在关节盘周围的关节囊部分，得关节盘样本； （2）样本处理：将所述关节盘样本放入缓冲液中清洗2~4次，洗去关节盘表面血凝块、组织碎片和杂质，弃去缓冲液； （3）酶消化：加入含链霉蛋白酶储存液的α-MEM溶液消化0.8~1.2h，离心弃上清，再加入含胶原酶P储存液的α-MEM溶液消化40~60min，得消化液；所述含链霉蛋白酶储存液的α-MEM溶液中链霉蛋白酶的终浓度为3~5mgml，所述含胶原酶P储存液的α-MEM溶液中胶原酶P的终浓度为2~3mgml； （4）获取单细胞悬液：加入所述消化液两倍体积的细胞完全培养基终止酶消化反应，过滤，获得单细胞悬液； （5）关节盘干细胞的分选：将所述单细胞悬液离心弃上清，用85~95μL磁珠分选缓冲液和8~12μLCD90.2磁珠标记细胞，避光孵育后，加入0.8~1.2mL磁珠分选缓冲液，收集CD90+细胞即为关节盘干细胞； （6）原代细胞种板：将所得关节盘干细胞种板，加入细胞完全培养基进行培养； （7）传代培养：每2~4天换液一次，至细胞融合度≥80%，移去旧培养基，胰蛋白酶消化1~2min，进行传代培养。

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