河南中医药大学张亚萍获国家专利权
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龙图腾网获悉河南中医药大学申请的专利基于AuNPs-SWCNT和HKUST-1高灵敏检测ERα的电化学检测试剂盒获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116539703B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-08发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310040066.2,技术领域涉及:C12Q1/68;该发明授权基于AuNPs-SWCNT和HKUST-1高灵敏检测ERα的电化学检测试剂盒是由张亚萍;郭亮;张淑玲;王梦丽;杨怀霞;刘艳菊设计研发完成,并于2023-01-13向国家知识产权局提交的专利申请。
本基于AuNPs-SWCNT和HKUST-1高灵敏检测ERα的电化学检测试剂盒在说明书摘要公布了:本发明公开了基于AuNPs‑SWCNT和HKUST‑1高灵敏检测ERα的电化学检测试剂盒,该试剂盒包括玻碳电极、PEI、HAuCl4·3H2O、SWCNT‑COOH、H2SO4、H3BTC、hemin、CuNO32·3H2O、EDC、NHS、Apt、Ab、MCH。本发明基于AuNPs‑SWCNT复合材料和hemin@HKUST‑1成功构建了一种高灵敏检测ERα的电化学检测试剂盒。本发明将hemin@HKUST‑1通过酰胺键与抗体连接,然后大的比表面积和稳定的多孔结构使HKUST‑1能够在捕获血红素和Ab后进行信号放大。之后固定在HKUST‑1上的hemin与过氧化氢发生氧化还原反应,产生电化学信号。该试剂盒可以实现对ERα的宽范围和高灵敏度检测,检测限低至27.8fg·mL‑1。该试剂盒具有优异的选择性、稳定性、重现性和抗干扰性,可以用于真实样品中ERα的检测。
本发明授权基于AuNPs-SWCNT和HKUST-1高灵敏检测ERα的电化学检测试剂盒在权利要求书中公布了:1.基于AuNPs-SWCNT和HKUST-1高灵敏ERα的非诊断和或治疗目的电化学检测方法,其特征在于,使用的原料包括:玻碳电极、PEI、HAuCl4·3H2O、SWCNT-COOH、H2SO4、H3BTC、hemin、CuNO32·3H2O、EDC、NHS、Apt、Ab、MCH; Apt的序列为:5′-SH-CH26-CCCGGCATGGTTGCGGAGCAGGAGTATAACACTACCATTG-3’; 所述检测方法包括以下步骤: (1)将AuNPs-SWCNT悬浮液滴加到玻碳电极表面,反应; (2)将Apt溶液滴加到步骤(1)的电极上,反应; (3)将步骤(2)的电极浸泡到MCH溶液中,反应; (4)将待测样品滴加到步骤(3)的电极上,反应; (5)将Ab-hemin@HKUST-1悬浮液滴加到步骤(4)的电极上,反应; (6)将步骤(5)的电极置于H2O2溶液中,通过方波伏安法测量电化学信号; 所述Ab-hemin@HKUST-1悬浮液的制备方法为: (1)将0.5gH3BTC和120mghemin溶解在15mL无水乙醇和DMF的混合溶剂中; (2)将1.04gCuNO32·3H2O添加到7.5mL超纯水中; (3)将步骤(1)和(2)的两种溶液混合均匀,在60℃水浴中反应7h;反应完成后,将反应溶液冷却至室温;然后,将反应溶液离心,沉淀用无水乙醇洗涤直至上清液变为无色,干燥,获得hemin@HKUST-1; (4)hemin@HKUST-1通过超声分散在5mL超纯水中,加入等体积的EDC溶液和NHS溶液并在37℃反应4h以活化羧基,通过离心除去上清液并将沉淀干燥,获得活化hemin@HKUST-1; (5)将40µLAb溶液和5mg活化hemin@HKUST-1添加到PBS缓冲液中反应4h,离心去除未结合的抗体后,将固体产物Ab-hemin@HKUST-1重悬于PBS缓冲液中。
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