厦门大学;嘉庚创新实验室张惠敏获国家专利权
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龙图腾网获悉厦门大学;嘉庚创新实验室申请的专利一种基于数字微流控技术的单细菌基因组测序方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115197840B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-08发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210987383.0,技术领域涉及:C12M1/42;该发明授权一种基于数字微流控技术的单细菌基因组测序方法是由张惠敏;郭俊南;杨朝勇;朱志设计研发完成,并于2022-08-17向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于数字微流控技术的单细菌基因组测序方法在说明书摘要公布了:本发明涉及单细菌测序领域,具体涉及一种基于数字微流控技术的单细菌基因组测序方法。本发明开发了基于全自动数字微流控平台DMF的适用于单细菌的微型裂解体系、数字微流控芯片及单细菌基因组测序技术,实验结果表明,裂解体系单细菌细胞裂解迅速、基因完整度好、组装效率及基因覆盖度高;同时该裂解体系及基于该裂解体系的微流控芯片与DMF的联用,减少了试剂的损耗,降低了样品污染风险、提高了反应效率、减小了扩增偏差,使之更适用于单细菌基因组测序。
本发明授权一种基于数字微流控技术的单细菌基因组测序方法在权利要求书中公布了:1.数字微流控芯片,其特征在于,包括细菌捕获及裂解单元、液滴生成通道、储液池单元和电极接口;所述储液池单元的数量不低于5个,分别存储有裂解试剂A、裂解试剂B、中和液、扩增试剂和菌液;其中, 裂解试剂A为:800~2400UμL溶菌酶、400~1200mM二硫苏糖醇和2~6mM乙二胺四乙酸; 裂解试剂B为:300~500mMKOH、80~120mM二硫苏糖醇和5~15mM乙二胺四乙酸; 中和液为:0.8~1.2MTris-HCl溶液; 扩增试剂为:随机引物、DNA聚合酶、dNTP、扩增缓冲液和二硫苏糖醇; 还包括:荧光染料、填充油和纯化试剂;所述荧光染料为FM1-43;所述填充油选自矿物油、氟油、硅烷油、二甲基硅油;所述纯化试剂选自柱纯化试剂或磁珠纯化试剂; 所述细菌捕获及裂解单元包括:上极板基底,设置在所述上极板基底下表面的ITO涂层,设置于所述ITO涂层下表面的上疏水层;下极板基底,设置于所述下极板基底上表面的介质层,嵌设于所述介质层内的电极,设置在所述介质层上表面的下疏水层,支撑于所述下疏水层和所述上疏水层之间的支撑体,所述上疏水层、所述下疏水层和所述支撑体之间形成液滴生成通道,所述下疏水层嵌设有亲水凹槽,所述亲水凹槽的上槽口与所述液滴生成通道相通;所述液滴生成通道的通口与所储液池单元连通;所述电极接口与所述电极相连接,所述亲水凹槽为中空的圆柱形结构,直径为150~300μm,与每个储液池皆有2个电极以上的距离。
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