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龙图腾网获悉江南大学申请的专利一种快速检测8种海洋芽孢杆菌的方法及其在发酵食品中的应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115343272B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-08发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210973277.7，技术领域涉及：G01N21/65；该发明授权一种快速检测8种海洋芽孢杆菌的方法及其在发酵食品中的应用是由陆震鸣;许正宏;徐蕾;梁源;柴丽娟;张晓娟;史劲松设计研发完成，并于2022-08-15向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种快速检测8种海洋芽孢杆菌的方法及其在发酵食品中的应用在说明书摘要公布了：本发明公开了一种快速检测8种海洋芽孢杆菌的方法及其在发酵食品中的应用，属于微生物检测与生态学应用领域。采用本发明的方法对8株海洋芽孢杆菌进行拉曼检测，利用海洋芽孢杆菌的特征波段建立训练模型对未知菌株鉴别。该方法应用到大曲中利用梯度离心、均质或涡旋的方式制备大曲菌悬液样品，单细胞进行拉曼检测，利用建立的海洋芽孢杆菌训练模型对未知细菌的拉曼光谱进行机器学习预测菌株的类型，实现大曲中海洋芽孢杆菌实时、快速、无标记检测，确定其海洋芽孢杆菌类型，该检测分析时间可缩短到几分钟。

本发明授权一种快速检测8种海洋芽孢杆菌的方法及其在发酵食品中的应用在权利要求书中公布了：1.一种用于鉴定海洋芽孢杆菌菌株种类的神经网络判别分析分类模型，其特征在于，所述神经网络模型是按照下述步骤建立的： （1）海洋芽孢杆菌菌悬液的制备： 分别将Oceanobacilluscaeni、Oceanobacilluskimchii、Oceanobacillus iheyensis、Oceanobacillussojae、Oceanobacillusoncorhynchi、Oceanobacillus profundus、Oceanobacillusjeddahense、Oceanobacilluskapialis菌株接种至培养基中进行发酵培养，分别取不同培养时间的培养液，即为海洋芽孢杆菌菌悬液； （2）海洋芽孢杆菌菌悬液的预处理： 分别将步骤（1）制备得到的菌悬液离心后，取沉淀，将沉淀加入无菌水后离心，重复2~3次后，得到预处理后的海洋芽孢杆菌菌悬液； （3）金纳米粒的制备： 利用柠檬酸三钠加热还原法，向烧瓶内加入超纯水与浓度为10mgmL的氯金酸钾溶液，混合均匀后加热至沸腾后，迅速加0.1%柠檬酸三钠溶液，继续保持沸腾，当观察到溶液呈现紫红色时停止加热，得到金纳米粒，所得金纳米粒径为10~50nm； （4）拉曼光谱检测： 将步骤（2）得到的海洋芽孢杆菌菌悬液与步骤（3）得到的金纳米粒混匀后进行单细胞拉曼光谱的采集，其中，光谱采集条件为：使用532nm激光，扫描光谱范围为500~3750cm-1，激光强度为1~300mW，采集时间为1~20s次，累积次数1次，不同培养时间的海洋芽孢杆菌菌悬液分别采集50~2000个细胞； （5）单细胞拉曼光谱数据的处理： 将步骤（4）得到的单细胞拉曼光谱数据进行宇宙射线的消除、背景噪音的去除、对基线进行校正处理、Savitzky-Golay平滑并对所有的数据进行归一化处理； （6）构建模型： 使用机器学习对海洋芽孢杆菌菌株建立神经网络判别分析分类模型：使用神经网络机器学习算法，将步骤（5）得到的海洋芽孢杆菌单细胞拉曼光谱数据，选择744cm-1、746cm-1、748cm-1、750cm-1、1128cm-1、1130cm-1、1304cm-1、1314cm-1、1316cm-1、1480cm-1、1482cm-1、1580cm-1、1582cm-1、1586cm-1、1588cm-1、1670cm-1、1678cm-1、1680cm-1特征波段进行机器学习，设置训练数据集和检测数据集，其中，训练数据集为收集数据的70%，检测数据集为收集数据的30%； 所述神经网络机器学习算法的参数为：隐藏层为100，激活函数使用ReLu，优化器为Adam，学习率0.0001； 所述海洋芽孢杆菌为OceanobacilluscaeniCGMCC1.10860、Oceanobacillus kimchiiJCM16803、OceanobacillusiheyensisCGMCC1.8643、OceanobacillussojaeNBRC105379、OceanobacillusoncorhynchiCGMCC1.8877、OceanobacillusprofundusCGMCC1.15219、OceanobacillusjeddahenseDSM28586、OceanobacilluskapialisDSM23158； 步骤（1）中的不同培养时间为培养6h、12h、24h得到的培养液； 步骤（4）中的取菌悬液与金纳米粒混合后置于拉曼芯片上，吹干后进行拉曼光谱的检测；金纳米粒与菌悬液混合体积比为（1：1）~（1：1×105）。

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