江苏华诺泰生物医药科技有限公司王海龙获国家专利权
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龙图腾网获悉江苏华诺泰生物医药科技有限公司申请的专利一种重组带状疱疹病毒原液的纯化方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120081913B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-12发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510586755.2,技术领域涉及:C07K14/04;该发明授权一种重组带状疱疹病毒原液的纯化方法是由王海龙;刘公兵;齐舒雅;杨鹏;赵斌;朱翔;邢超;刘环设计研发完成,并于2025-05-08向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种重组带状疱疹病毒原液的纯化方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种重组带状疱疹病毒原液的纯化方法,具体涉及生物医药技术领域。所述方法包括阴离子交换层析、疏水层析和复合层析。本发明可用于高纯度重组带状疱疹蛋白原液的制备,对超滤浓缩液的单次处理量高,纯度可达到98%以上,适用于要求纯度大于95%的重组带状疱疹疫苗制剂的大规模生产,并可根据生产规模进行扩缩,用于生产高纯度抗原的精制重组带状疱疹疫苗。
本发明授权一种重组带状疱疹病毒原液的纯化方法在权利要求书中公布了:1.一种重组带状疱疹病毒原液的纯化方法,其特征在于,包括以下步骤: 步骤一,阴离子交换层析 将经过初滤得到的澄清蛋白初滤液,通过经平衡液平衡后的阴离子交换层析洗脱液进行洗脱并收集,得到初始蛋白液;其中,阴离子交换层析的层析柱型号为Cytiva的BPG450型层析柱,填料为SamcQ40; 初滤是先通过复合型玻璃纤维进行深层过滤,再经聚醚砜膜过滤得到澄清蛋白初滤液;其中,复合型玻璃纤维滤芯的孔径为0.8+0.45μm,聚醚砜膜过滤孔径为0.45μm,流速控制在0.5Lmin,压力小于15psi;平衡液为磷酸盐缓冲液与氯化钠溶液的混合液;氯化钠浓度为0.2-1.0M;磷酸盐缓冲液pH为7.0~8.0; 步骤二,疏水层析 初始蛋白液经灭活剂灭活后的灭活液,经疏水层析洗脱,得到的洗脱液经浓缩后,得到浓缩蛋白液;其中,疏水层析的层析柱采用Cytiva的BPG200型层析柱,填料为PhentyIChromstarHP;阴离子纯化灭活液加入至终浓度为10-40%的硫酸铵,0.25MPBS缓冲液平衡层析柱4个柱体积后上样,用10-40%硫酸铵,0.25MPBS缓冲液冲洗至基线,用0.25MPBS缓冲液收集洗脱峰;使用50kDa孔径的超滤膜对纯化液进行浓缩,用复和层析平衡液重悬换液5次; 步骤三,复合层析 将浓缩蛋白液使用多模式层析填料的复和层析进行洗脱,上样后洗脱5CV,收集流穿液,得到的洗脱液经除菌过滤后得到纯化的重组带状疱疹蛋白原液,其中,多模式层析填料选用CaptoCore700。
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