江南大学张荣珍获国家专利权
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龙图腾网获悉江南大学申请的专利定向进化提高7β-羟基类固醇脱氢酶正向酶活高效合成熊去氧胆酸获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119506235B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-12发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411489745.9,技术领域涉及:C12N9/04;该发明授权定向进化提高7β-羟基类固醇脱氢酶正向酶活高效合成熊去氧胆酸是由张荣珍;解修兵设计研发完成,并于2024-10-24向国家知识产权局提交的专利申请。
本定向进化提高7β-羟基类固醇脱氢酶正向酶活高效合成熊去氧胆酸在说明书摘要公布了:本发明公开了定向进化提高7β‑羟基类固醇脱氢酶正向酶活高效合成熊去氧胆酸,属于生物催化工程领域。本发明获得正向反应活性及与底物亲和力提高的7β‑羟基类固醇脱氢酶突变体TEAEF152LW101N。相比于TEAE,突变体酶正向酶活力提高2.9倍,反向活性降低3.6倍,对7K‑LCA的催化效率kcatKm提高4.3倍,相比于野生型,突变体TEAEF152LW101N的酶活性增加206.23倍,对7K‑LCA的催化效率提高了58.56倍。本发明为定向进化羟基类固醇脱氢酶提供了一种通用的技术平台,为生物高效合成熊去氧胆酸提供了优良突变酶,为实现熊去氧胆酸的高效低成本制备奠定了扎实的研究基础。
本发明授权定向进化提高7β-羟基类固醇脱氢酶正向酶活高效合成熊去氧胆酸在权利要求书中公布了:1.一种7β-羟基类固醇脱氢酶突变体,其特征在于,所述突变体为, 将氨基酸序列如SEQIDNO.3所示的7β-羟基类固醇脱氢酶的第152位的苯丙氨酸突变为亮氨酸得到的; 或将氨基酸序列如SEQIDNO.3所示的7β-羟基类固醇脱氢酶的第152位的苯丙氨酸突变为亮氨酸,同时将第101位的色氨酸突变为天冬酰胺、缬氨酸或脯氨酸得到的; 或将氨基酸序列如SEQIDNO.3所示的7β-羟基类固醇脱氢酶的第152位的苯丙氨酸突变为亮氨酸,同时将第201位的酪氨酸突变为甲硫氨酸得到的; 或将氨基酸序列如SEQIDNO.3所示的7β-羟基类固醇脱氢酶的第152位的苯丙氨酸突变为亮氨酸,将第101位的色氨酸突变为天冬酰胺,同时将第201位的酪氨酸突变为半胱氨酸、天冬氨酸、精氨酸或苯丙氨酸得到的。
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