津宁植化(广州)科技发展有限责任公司王洁华获国家专利权
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龙图腾网获悉津宁植化(广州)科技发展有限责任公司申请的专利一种猫豆胚性愈伤增殖的悬浮培养方法及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118909914B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-12发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411176078.9,技术领域涉及:C12N5/04;该发明授权一种猫豆胚性愈伤增殖的悬浮培养方法及其应用是由王洁华;何蕴轩;赵锡蝶;宋文芹设计研发完成,并于2024-08-26向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种猫豆胚性愈伤增殖的悬浮培养方法及其应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种猫豆胚性愈伤增殖的悬浮培养方法及其应用。首先提供了一种猫豆胚性愈伤增殖的培养基组合,对其中的培养基组分进行筛选使其适用于猫豆胚性愈伤细胞增殖的悬浮培养。在所述培养基组合基础上提供一种猫豆细胞悬浮培养的方法,所提供的猫豆胚性愈伤增殖的悬浮培养方法可建立稳定的猫豆胚性愈伤悬浮细胞系,本发明可为猫豆体细胞胚胎分化、成熟、杂交融合及种质资源保存研究提供稳定材料,为良种、新品种开发、次生代谢开发提供重要理论依据和参考。
本发明授权一种猫豆胚性愈伤增殖的悬浮培养方法及其应用在权利要求书中公布了:1.一种猫豆胚性愈伤增殖的悬浮培养方法,其特征在于,包括以下步骤: S1.猫豆种子消毒:将种子冲洗、浸泡、消毒,去种皮处理后接种于培养基①中,诱导种子萌发至生长成为具有两对叶片的植株; S2.猫豆胚性愈伤组织诱导:将S1所得植株的叶片进行创伤处理后接种于培养基②中暗处理培养至叶片卷曲,再进行光照培养至形成愈伤,获得胚性愈伤; S3.猫豆胚性愈伤悬浮培养初始材料的筛选:挑选S2中具有松散、生长快、活力旺盛的胚性愈伤接种于培养基③中进行增殖培养,再进行3~4代愈伤继代筛选,获得胚性愈伤悬浮培养初始材料; S4.猫豆胚性愈伤悬浮初级培养:将S3得到的胚性愈伤悬浮培养初始材料转接到培养基④中进行悬浮培养,筛选3~4代后获得胚性愈伤悬浮物; S5.猫豆胚性愈伤细胞悬浮增殖培养:将S4得到的胚性愈伤悬浮物,沉淀处理,取沉积胚性组织加入培养基④进行悬浮培养,取培养后的沉积胚性组织接入权利要求1中所述培养基④中进行继代增殖悬浮震荡培养,获得猫豆胚性愈伤悬浮细胞系; 培养基①:MS培养基加卡拉胶7.5~8.8gL、蔗糖20~30gL、VC0.5~1.5mgL; 培养基②:MS培养基加卡拉胶7.5~9.5gL、蔗糖15~30gL、6-BA0.5~1.5mgL、NAA0.05~0.5mgL; 培养基③:MS培养基加卡拉胶7.5~10gL、蔗糖10~35gL、6-BA1.0~3.0mgL、NAA0.05~1.0mgL、VC0.5~1.0mgL; 培养基④:12MS培养基加蔗糖10~15gL、6-BA3.0~4.5mgL、NAA0.05~0.8mgL、VC0.5~2.0mgL。
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