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龙图腾网获悉云南省农业科学院甘蔗研究所申请的专利一种快速检测甘蔗梢腐病三种致病菌的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118703682B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-12发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202410973712.5，技术领域涉及：C12Q1/6895；该发明授权一种快速检测甘蔗梢腐病三种致病菌的方法是由王长秘;李如丹;李银煳;单红丽;尹炯;张荣跃;王晓燕;李婕;罗志明设计研发完成，并于2024-07-19向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种快速检测甘蔗梢腐病三种致病菌的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种快速检测甘蔗梢腐病三种致病菌的方法，包括以下步骤：基因组DNA的提取；提供引物对：选取甘蔗梢腐病轮枝镰刀菌、层出镰刀菌和甘蔗镰刀菌三种致病菌中一种或多种检测引物的上游引物和下游引物；提供检测试剂：检测试剂包括2×EasyTaqPCRSuperMix和灭菌去离子水；置入PCR反应体系中进行PCR反应；结果判定：对所述扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，根据电泳结果进行判定。本发明可在一次PCR扩增反应内同时检测甘蔗梢腐病轮枝镰刀菌、层出镰刀菌以及甘蔗镰刀菌三种致病菌；本发明建立的多重PCR检测方法可用于轮枝镰刀菌、层出镰刀菌以及甘蔗镰刀菌病原菌检测，也能对田间感染轮枝镰刀菌、层出镰刀菌以及甘蔗镰刀菌甘蔗病样进行检测。

本发明授权一种快速检测甘蔗梢腐病三种致病菌的方法在权利要求书中公布了：1.一种快速检测甘蔗梢腐病三种致病菌的方法，其特征在于，包括以下步骤： S1、基因组DNA的提取：采用真菌基因组DNA提取试剂盒按说明书提取轮枝镰刀菌、层出镰刀菌和甘蔗镰刀菌菌株基因组DNA为检测样本；以健康甘蔗叶片基因组DNA为阴性对照，以无菌ddH2O为空白对照，后置于-20℃冰箱保存； S2、提供引物对：选取甘蔗梢腐病轮枝镰刀菌、层出镰刀菌和甘蔗镰刀菌三种致病菌中一种或多种检测引物的上游引物和下游引物； S3、提供检测试剂：检测试剂包括2×EasyTaqPCRSuperMix和灭菌去离子水； S4、置入PCR反应体系中进行PCR反应： S4.1、原料准备：取5～15μL的2×EasyTaqPCRSuperMix，取0.75～2.25μL的上游引物，取0.75～2.25μL的下游引物，取1～3μL的基因组DNA，取2.5～7.5μL的灭菌去离子水； S4.2、反应过程：将上述原料混合，在92～96℃下预变性2～4min、在92～96℃下变性25～35秒、在56～60℃下退火25～35秒、在70～74℃下延伸1～2min、进行34～36个循环，最后在72℃下再延伸4～6min； S5、结果判定：对S4所得产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，根据电泳结果中轮枝镰刀菌扩增出292bp条带、层出镰刀菌扩增出592bp条带、甘蔗镰刀菌扩增出723bp条带，阴性对照扩增的目的条带和空白对照扩增的目的条带，判断待测样品；当待测样品电泳结果中含有三种致病菌对应的条带，则判定待测样品中含有对应的病原菌； S2中，轮枝镰刀菌、层出镰刀菌和甘蔗镰刀菌三种致病菌中上游引物和下游引物特异扩增得到引物对的核苷酸序列如下： 轮枝镰刀菌特异扩增引物对：产物长度为292bp，序列分别为FV-F：TTGTCTATGCGCTGGCCTTT和FV-R：AGATAGAGCGCCTCGTCGTA； 层出镰刀菌特异扩增引物对：产物长度为592bp，序列分别为FP-F：ATCATCAACGGTCTCGCTGG和FP-R：ACTCCTTTTCACTGTTCGCGG； 甘蔗镰刀菌特异扩增引物对：产物长度为723bp，序列分别为FS-F：TCTCGCCACTACTCGTTC和FS-R：TCACCCTCCATACCCTCT。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人云南省农业科学院甘蔗研究所，其通讯地址为：661699 云南省红河哈尼族彝族自治州开远市灵泉东路363号；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。