上海市农业科学院杨焱获国家专利权
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龙图腾网获悉上海市农业科学院申请的专利一种猴头菌沪猴1210号菌株MNP标记的多重PCR扩增及其基因型鉴定方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118745456B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-12发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202410922961.1,技术领域涉及:C12Q1/6858;该发明授权一种猴头菌沪猴1210号菌株MNP标记的多重PCR扩增及其基因型鉴定方法是由杨焱;李巧珍;张忠;吴迪;李正鹏;李文;陈万超设计研发完成,并于2024-07-10向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种猴头菌沪猴1210号菌株MNP标记的多重PCR扩增及其基因型鉴定方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种猴头菌沪猴1210号菌株MNP标记的多重PCR扩增及其基因型鉴定方法,属于猴头菌菌种检测技术领域,通过设置9对MNP标记引物的混合引物对和猴头菌菌种DNA进行多重PCR扩增及基因型鉴定,可以通过9对MNP标记引物对与菌丝基因组DNA进行多重PCR扩增,确定MNP基因型,之后通过比对9对MNP标记基因型,快速的辨别每一组菌菇中的“沪猴1210号”菌株,与常规形态学检测、拮抗试验、出菇试验相比,具有准确性高、特异性强、可重复性好的优点,通过该方法中的多种工序能够针对猴头菌中的“沪猴1210号”菌株进行精确的筛选。
本发明授权一种猴头菌沪猴1210号菌株MNP标记的多重PCR扩增及其基因型鉴定方法在权利要求书中公布了:1.一种猴头菌沪猴1210号菌株MNP标记的多重PCR扩增及其基因型鉴定方法,其特征在于,该方法包括以下步骤: 步骤一、菌丝培养:将猴头菌菌丝转接到PDA平板上,25℃下避光培养,15d后收集菌丝; 步骤二、基因组DNA的提取:用CTAB法提取上述菌丝的基因组DNA,紫外分光光度法检测总基因组DNA浓度和纯度,调整样品DNA的浓度为100~200nguL: 步骤三、多重PCR扩增:将MNP标记引物组内的9对引物等量混合后对上述提取的DNA进行多重PCR扩增; 步骤四、测序:将上述多重PCR的产物加上Illumina的测序接头和barcode并使用Illumina测序仪进行测序; 步骤五、将步骤四中Illumina测序仪的测序结果进行MNP标记基因型鉴定; 所述猴头菌“沪猴1210号”菌种菌株的MNP标记引物组,利用猴头菌基因组多个核苷酸多态性开发的9对MNP标记引物的混合,对猴头菌菌种进行MNP基因型鉴定,将得到的基因型与“沪猴1210号”菌种的基因型对照,与该基因型一致即为猴头菌“沪猴1210号”菌种; 9对MNP标记引物组序列为SEQIDNO.1~SEQIDNO.18。
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