上海碧云天生物技术股份有限公司葛新建获国家专利权
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龙图腾网获悉上海碧云天生物技术股份有限公司申请的专利经修饰的免疫磁珠、其制备方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118307681B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-12发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202410405199.X,技术领域涉及:C07K17/14;该发明授权经修饰的免疫磁珠、其制备方法及应用是由葛新建;周想燕;王利芳;张美玲;孙海燕设计研发完成,并于2024-04-03向国家知识产权局提交的专利申请。
本经修饰的免疫磁珠、其制备方法及应用在说明书摘要公布了:本发明提供了一种经修饰的免疫磁珠、其制备方法及应用。所述免疫磁珠非特异吸附作用低,表面的功能基团密度高、稳定性好。制备所述免疫磁珠的方法包括:利用两亲性嵌段共聚物包被疏水磁珠,获得两亲性磁珠,在磁珠表面偶联甲苯磺酰基官能团。所述磁珠偶联目标蛋白或抗体等后,用于多种多样的免疫反应。
本发明授权经修饰的免疫磁珠、其制备方法及应用在权利要求书中公布了:1.一种制备免疫磁珠的方法,其特征在于,所述方法包括: 1制备疏水磁珠;所述疏水磁珠为疏水性氧化铁磁珠OA@Fe3O4;所述疏水磁珠的制备方法包括:以油酸包被氧化铁,获得油酸包被的疏水磁珠; 2在所述疏水磁珠上包被两亲性嵌段共聚物,获得两亲性嵌段共聚物包被的磁珠; 所述的两亲性嵌段共聚物为PEG-b-PMPS,其包括亲水端和疏水端,所述亲水端为聚乙二醇PEG,所述疏水端为聚3-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷PMPS;所述PEG的分子量6000±500;所述PEG-b-PMPS的结构如下: ; 其中,x为20~30,n的取值符合所述PEG的分子量; 通过将PEG6000±500、三乙胺TEA、2-氯-2,2-二苯基乙酰氯CTA加入四氢呋喃混合、常压回流;去除四氢呋喃,加入氯仿形成溶液;以碳酸氢钠溶液洗涤,有机相干燥,去除溶剂后获得PEG-CTA; 通过将所述PEG-CTA与3-三甲氧基甲硅基甲基丙烯酸丙酯MPS、偶氮二异丁腈AIBN加入到1,4-二氧六环中,混合,真空密封,70℃油浴聚合,石油醚沉淀制备获得所述PEG-b-PMPS; 通过将所述PEG-b-PMPS溶解在无水四氢呋喃中,与所述OA@Fe3O4混合均匀,老化,搅拌下逐滴加入到去离子水中,用40µm细胞过滤器透析去除大块的团聚,收集流穿液得所述两亲性嵌段共聚物包被的磁珠; 3对所述两亲性嵌段共聚物包被的磁珠进行甲苯磺酰化反应,获得甲苯磺酰化两亲性磁珠; 所述两亲性磁珠的表面先修饰3-氨基丙基三乙氧基硅烷APTES;包括异丙醇超声分散所述两亲性嵌段共聚物包被的磁珠、加入APTES、洗涤后将磁珠分散在丙酮中;然后与4-甲苯磺酰氯于室温下反应,从而甲苯磺酰氯的氯直接与氨基磁珠反应; 4对所述甲苯磺酰化两亲性磁珠进行偶联和封闭,获得所述免疫磁珠; 将所述甲苯磺酰化两亲性磁珠与捕获分子进行偶联,以含有聚甲基丙烯酰氧基乙基磷酰胆碱PMPC的封闭液进行封闭,获得偶联有捕获分子的免疫磁珠;所述封闭液为PBS缓冲液,含有BSA及0.05~0.3%PMPC。
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